Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
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bioMérieux0' SA pour l’identification d’entérobactéries et autres bacilles à
Gram-, qui utilise de la gélatine d’origine bovine ;
-une méthode lente avec une gélatine nutritive, mais qui n’a plus qu’un intérêt pédagogique aujourd'hui. Elle peut être réalisée sur un milieu gélatine nutritive.
► Composition chimique du milieu de culture
Le milieu gélatine nutritive conventionnel a la composition chimique en g/L
d’eau distillée suivante :
Peptone de viande..................................................................................
5
Extrait de viande..................................................................................... 3
Gélatine......................................................................................................120
pH 7,0 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 10 minutes à 115 C
► Ensemencement et incubation du milieu
Prendre les tubes de gélatine solidifiée (en culot), ayant séjourné préalablement dans de l’eau froide ; les ensemencer par piqûre centrale dans le culot avec
les souches bactériennes à étudier.
Incuber les tubes à 37 °C pendant 48 heures, puis les placer pendant une heure
environ à +4 °C.
► Lecture et interprétation du milieu
La gélatine étant une protéine liquide à la température d'incubation, il est donc
nécessaire de mettre les tubes au froid avant de les observer.
La lecture et l’interprétation sont données dans le tableau 67, ainsi que des
exemples de bactéries possédant ou non cette enzyme.
Tableau 67 ■ Observations et résultats du test gélatinase chez des entérobactéries et
d autres bacilles à Gram-.
Observations
après passage
au froid
Résultats du test
gélatinase
Bactéries
Milieu liquide :
gélatine hydrolysée
Gélatinase+
Profeus mirabilis (82 % + )
P. vulgaris (74 % + )
Serratia marcescens (87 % + )...
Vibrio cholerae (92 % + ), Vibrio alginolyticus (75 % + * )...
Pseudomonas aeruginosa (75 % + ),
Ps. fluorescens/putida (27 % + )
Milieu solide :
gélatine non hydrolysée
GélatinaseEntérobactéries (0 % +') sauf espèces de
Proteus et Serratia
Serratia fonticola (0 % +’)
|
À titre indicatif, d'après le tableau d'identification API 20E (bioMérieux " SA. 2004) pour le test gélatine de
o cette galerie.
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bioMérieux0' SA pour l’identification d’entérobactéries et autres bacilles à
Gram-, qui utilise de la gélatine d’origine bovine ;
-une méthode lente avec une gélatine nutritive, mais qui n’a plus qu’un intérêt pédagogique aujourd'hui. Elle peut être réalisée sur un milieu gélatine nutritive.
► Composition chimique du milieu de culture
Le milieu gélatine nutritive conventionnel a la composition chimique en g/L
d’eau distillée suivante :
Peptone de viande..................................................................................
5
Extrait de viande..................................................................................... 3
Gélatine......................................................................................................120
pH 7,0 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 10 minutes à 115 C
► Ensemencement et incubation du milieu
Prendre les tubes de gélatine solidifiée (en culot), ayant séjourné préalablement dans de l’eau froide ; les ensemencer par piqûre centrale dans le culot avec
les souches bactériennes à étudier.
Incuber les tubes à 37 °C pendant 48 heures, puis les placer pendant une heure
environ à +4 °C.
► Lecture et interprétation du milieu
La gélatine étant une protéine liquide à la température d'incubation, il est donc
nécessaire de mettre les tubes au froid avant de les observer.
La lecture et l’interprétation sont données dans le tableau 67, ainsi que des
exemples de bactéries possédant ou non cette enzyme.
Tableau 67 ■ Observations et résultats du test gélatinase chez des entérobactéries et
d autres bacilles à Gram-.
Observations
après passage
au froid
Résultats du test
gélatinase
Bactéries
Milieu liquide :
gélatine hydrolysée
Gélatinase+
Profeus mirabilis (82 % + )
P. vulgaris (74 % + )
Serratia marcescens (87 % + )...
Vibrio cholerae (92 % + ), Vibrio alginolyticus (75 % + * )...
Pseudomonas aeruginosa (75 % + ),
Ps. fluorescens/putida (27 % + )
Milieu solide :
gélatine non hydrolysée
GélatinaseEntérobactéries (0 % +') sauf espèces de
Proteus et Serratia
Serratia fonticola (0 % +’)
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À titre indicatif, d'après le tableau d'identification API 20E (bioMérieux " SA. 2004) pour le test gélatine de
o cette galerie.