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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
La réalisation du test IMVIC (sans l'inositol) est recommandée dans plusieurs
normes de microbiologie des aliments, voire des eaux, citées dans les paragraphes de présentation de ces tests. Les résultats de ce test sont les suivants :
- les Escherichia coli typiques sont en général indole+, RM+, VP-, citrate-,
alors que les E. coli atypique sont indole—, RM+, VP—, citrate— ;
- les Citrobacter typiques sont indole-, RM+, VP-, citrate+ et les Citrobacter
atypiques sont indole-t-, RM+, VP-, citrate+ ;
- les Enterobacter typiques ou Klebsiella sont indole-, RM-, VP+, citrate+
alors que les Enterobacter atypiques sont indole+, RM-, VP+, citrate+.
2.5.
Milieu de culture pour l’utilisation du citrate de sodium
Certaines bactéries, dont les entérobactéries, sont capables d’assimiler le
citrate de sodium comme seule source de carbone et d’énergie du milieu. La
recherche de cette propriété se fait avec le milieu de Simmons au citrate de
sodium, initialement décrit par Simmons en 1926 : elle constitue le test citrate.
La gélose citrate de Simmons Bio-Rad est utilisée pour rechercher l'utilisation éventuelle du citrate par les coliformes fécaux et Escherichia coli, lors de la réalisation du
test IMVIC ((/. supra, paragraphe 2.4.3.) ou lors de l’identification d’entérobactéries.
Elle est conforme à la norme NF ISO 10273 (1995) relative à la recherche des
Yersinia enterocolitica et à la norme NF V 08-017 (1980) pour le dénombrement
des coliformes fécaux et d'Escherichia coli dans les aliments.
2.5.1.
Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique (formule type) de ce milieu en g/L d’eau distillée est :
Citrate de sodium..................................................................................
1
Chlorure de sodium................................................................................ 5
Sulfate de magnésium........................................................................... 200 mg
Dihydrogénophosphate d’ammonium..................................................
1
Monohydrogénophosphate de potassium............................................
1
Bleu de bromothymol................................
80 mg
Agar......................................................................................................... 13
pH final 6,8 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave : 20 minutes à 121 ± 1 °C
C e milieu est disponible en milieu déshydraté et en tubes de 7 mL prêts à
l'emploi (milieu coloré en vert).
2.5.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer la pente de ce milieu gélosé en stries longitudinales et parallèles
à 1 aide d une pipette, préalablement stérilisée à la flamme, à partir d'une colonie
isolée prélevée sur une gélose nutritive.
Incuber à 37 ± l C pendant 24 heures. En cas de réaction négative, prolonger
I incubation de 24 heures.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
La réalisation du test IMVIC (sans l'inositol) est recommandée dans plusieurs
normes de microbiologie des aliments, voire des eaux, citées dans les paragraphes de présentation de ces tests. Les résultats de ce test sont les suivants :
- les Escherichia coli typiques sont en général indole+, RM+, VP-, citrate-,
alors que les E. coli atypique sont indole—, RM+, VP—, citrate— ;
- les Citrobacter typiques sont indole-, RM+, VP-, citrate+ et les Citrobacter
atypiques sont indole-t-, RM+, VP-, citrate+ ;
- les Enterobacter typiques ou Klebsiella sont indole-, RM-, VP+, citrate+
alors que les Enterobacter atypiques sont indole+, RM-, VP+, citrate+.
2.5.
Milieu de culture pour l’utilisation du citrate de sodium
Certaines bactéries, dont les entérobactéries, sont capables d’assimiler le
citrate de sodium comme seule source de carbone et d’énergie du milieu. La
recherche de cette propriété se fait avec le milieu de Simmons au citrate de
sodium, initialement décrit par Simmons en 1926 : elle constitue le test citrate.
La gélose citrate de Simmons Bio-Rad est utilisée pour rechercher l'utilisation éventuelle du citrate par les coliformes fécaux et Escherichia coli, lors de la réalisation du
test IMVIC ((/. supra, paragraphe 2.4.3.) ou lors de l’identification d’entérobactéries.
Elle est conforme à la norme NF ISO 10273 (1995) relative à la recherche des
Yersinia enterocolitica et à la norme NF V 08-017 (1980) pour le dénombrement
des coliformes fécaux et d'Escherichia coli dans les aliments.
2.5.1.
Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique (formule type) de ce milieu en g/L d’eau distillée est :
Citrate de sodium..................................................................................
1
Chlorure de sodium................................................................................ 5
Sulfate de magnésium........................................................................... 200 mg
Dihydrogénophosphate d’ammonium..................................................
1
Monohydrogénophosphate de potassium............................................
1
Bleu de bromothymol................................
80 mg
Agar......................................................................................................... 13
pH final 6,8 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l'autoclave : 20 minutes à 121 ± 1 °C
C e milieu est disponible en milieu déshydraté et en tubes de 7 mL prêts à
l'emploi (milieu coloré en vert).
2.5.2. Ensemencement et incubation du milieu
Ensemencer la pente de ce milieu gélosé en stries longitudinales et parallèles
à 1 aide d une pipette, préalablement stérilisée à la flamme, à partir d'une colonie
isolée prélevée sur une gélose nutritive.
Incuber à 37 ± l C pendant 24 heures. En cas de réaction négative, prolonger
I incubation de 24 heures.