Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification bactérienne
149
► Lecture et interprétation du milieu
L’hydrolyse de l’esculine est catalysée par une P-glucosidase, l’esculinase, qui
coupe la liaison glucosidique entre le glucose et l’esculétine (dihydroxy 6,
7 coumarine) ; ce dernier composé se complexe avec les ions fer (III) du citrate
de fer ammoniacal pour donner un composé de coloration foncée à noire qui diffuse dans le milieu.
La lecture et l’interprétation de la gélose à l’esculine sont décrites dans le
tableau 64, ainsi que des exemples.
Tableau 64 ■ Observations et résultats du test esculine chez quelques bactéries.
Observation
du tube
Test esculine
Bactéries1
Noircissement
Esculine+
Burkholderia cepacia, Klebsiella pneumoniae
ATCC 13883 * ,
Listeria monocytogenes, streptocoques du groupe D (Enterococcus dont Enterococcus faecalis var. zymogenes ATCC 29212 * ,
Streptococcus), Xanthomonas nialtophilia (exStenotrophomonas nialtophilia), Yersinia pseudotuberculosis...
Absence de
noircissement
EsculineErysipelothrix rhusiopathiae2, Pseudomonas
aeruginosa ATCC 27853 * .
Staphylococcus aureus
ATCC 25923 * ,
Yersinia enterocolitica...
En contrôle de qualité Bio-Rad de ce milieu (croissance des quatre souches après 24 heures d'incubation
à 37 °C).
1. Cf. fiche technique Bio-Rad pour d’autres exemples.
2. Responsable du rouget du porc, pouvant contaminer l’homme par voie cutanée (piqûre).
2.4.
Milieux de culture pour l’étude des dérivés de l’acide pyruvique
Le milieu MR-VP (bouillon pour épreuve au rouge de méthyle et test de
Voges-Proskauer) VWR™ International (Merck) est un milieu connu sous son
appellation d’origine, milieu de Clark et Lubs (1915).
Il permet de différencier les fermentations acides mixtes et la fermentation
butanediolique chez les entérobactéries. II est conforme aux normes ISO (1975),
DIN 10160 pour l’analyse des viandes et DIN 10181 pour l'analyse du lait.
► Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique type de ce milieu de culture g/L d'eau distillée est :
Peptone de viande ................................................................................
7
D (+) glucose......................................................................................... 5
Tampon phosphate................................................................................
5
pH final 6,9 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave 15 minutes à 121 °C
À partir du milieu déshydraté, préparer des tubes suivant les indications du
fabricant.
149
► Lecture et interprétation du milieu
L’hydrolyse de l’esculine est catalysée par une P-glucosidase, l’esculinase, qui
coupe la liaison glucosidique entre le glucose et l’esculétine (dihydroxy 6,
7 coumarine) ; ce dernier composé se complexe avec les ions fer (III) du citrate
de fer ammoniacal pour donner un composé de coloration foncée à noire qui diffuse dans le milieu.
La lecture et l’interprétation de la gélose à l’esculine sont décrites dans le
tableau 64, ainsi que des exemples.
Tableau 64 ■ Observations et résultats du test esculine chez quelques bactéries.
Observation
du tube
Test esculine
Bactéries1
Noircissement
Esculine+
Burkholderia cepacia, Klebsiella pneumoniae
ATCC 13883 * ,
Listeria monocytogenes, streptocoques du groupe D (Enterococcus dont Enterococcus faecalis var. zymogenes ATCC 29212 * ,
Streptococcus), Xanthomonas nialtophilia (exStenotrophomonas nialtophilia), Yersinia pseudotuberculosis...
Absence de
noircissement
EsculineErysipelothrix rhusiopathiae2, Pseudomonas
aeruginosa ATCC 27853 * .
Staphylococcus aureus
ATCC 25923 * ,
Yersinia enterocolitica...
En contrôle de qualité Bio-Rad de ce milieu (croissance des quatre souches après 24 heures d'incubation
à 37 °C).
1. Cf. fiche technique Bio-Rad pour d’autres exemples.
2. Responsable du rouget du porc, pouvant contaminer l’homme par voie cutanée (piqûre).
2.4.
Milieux de culture pour l’étude des dérivés de l’acide pyruvique
Le milieu MR-VP (bouillon pour épreuve au rouge de méthyle et test de
Voges-Proskauer) VWR™ International (Merck) est un milieu connu sous son
appellation d’origine, milieu de Clark et Lubs (1915).
Il permet de différencier les fermentations acides mixtes et la fermentation
butanediolique chez les entérobactéries. II est conforme aux normes ISO (1975),
DIN 10160 pour l’analyse des viandes et DIN 10181 pour l'analyse du lait.
► Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique type de ce milieu de culture g/L d'eau distillée est :
Peptone de viande ................................................................................
7
D (+) glucose......................................................................................... 5
Tampon phosphate................................................................................
5
pH final 6,9 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave 15 minutes à 121 °C
À partir du milieu déshydraté, préparer des tubes suivant les indications du
fabricant.