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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Lecture et interprétation du bouillon de Mac Conkey
La bile de bœuf inhibe la plupart des bactéries à Gram+.
Après incubation, la présence d’un trouble et du virage au jaune du pourpre de
bromocrésol indique que le lactose a été dégradé avec production d’acides. C’est
le cas avec les souches d'Escherichia coli, mais dans les « limites du test » relatives à ce milieu, il est précisé :
- certaines souches de E. coli lactose- n’entraînent pas de virage au jaune du
bouillon ;
- il existe des souches de E. coli non thermotolérantes qui ne se développent
pas à 43-45 °C dans le bouillon ;
- il est possible que certaines souches de bactéries Gram+ (notamment
Enterococcus faecalis) se développent dans le bouillon.
2.2.3. Milieux de culture contenant au moins deux sucres
Des milieux de culture contenant deux sucres ou plus sont commercialisés
pour cultiver principalement des Enterobacteriaceae et étudier leur métabolisme
glucidique.
Le plus connu, et aussi le plus ancien, est le milieu initialement mis au point par
Kligler en 1917. qui a ensuite été modifié. Il est connu sous l’appellation milieu
lactose-glucose-H2S ou gélose de Kligler-Hajna (Bio-Rad...) ; il est parfois simplement dénommé milieu de Kligler (bioMérieux® SA...). Les compositions chimiques de ces milieux sont similaires et permettent de faire les mêmes tests
biochimiques.
2.2.3.1. Milieu de Kligler bioMérieux® SA
Il est utilisé principalement pour orienter l'identification des entérobactéries
(bacilles à Gram-). Il permet de mettre en évidence en 24 heures les fermentations du glucose et du lactose, la production d'hydrogène sulfuré (H->S) et de gaz
provenant de la fermentation du glucose. Jusque dans les années 1990, il a été
utilisé également pour la recherche de la lysine décarboxylase (LDC).
► Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin)............................ 20
Lactose (bovin)...................................................................................... 10
Glucose...............................................................
1
Saccharose.............................................................
10
Chlorure de sodium...............................................................................
5
Citrate de fer ammoniacal.....................................................................
0,5
Thiosulfate de sodium...............................................
0,5
Rouge de phénol.........................................................
0,025
Aear.....................................................15
pH 7,3
Stérilisation à l'autoclave : 15 minutes à 118 °C
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Lecture et interprétation du bouillon de Mac Conkey
La bile de bœuf inhibe la plupart des bactéries à Gram+.
Après incubation, la présence d’un trouble et du virage au jaune du pourpre de
bromocrésol indique que le lactose a été dégradé avec production d’acides. C’est
le cas avec les souches d'Escherichia coli, mais dans les « limites du test » relatives à ce milieu, il est précisé :
- certaines souches de E. coli lactose- n’entraînent pas de virage au jaune du
bouillon ;
- il existe des souches de E. coli non thermotolérantes qui ne se développent
pas à 43-45 °C dans le bouillon ;
- il est possible que certaines souches de bactéries Gram+ (notamment
Enterococcus faecalis) se développent dans le bouillon.
2.2.3. Milieux de culture contenant au moins deux sucres
Des milieux de culture contenant deux sucres ou plus sont commercialisés
pour cultiver principalement des Enterobacteriaceae et étudier leur métabolisme
glucidique.
Le plus connu, et aussi le plus ancien, est le milieu initialement mis au point par
Kligler en 1917. qui a ensuite été modifié. Il est connu sous l’appellation milieu
lactose-glucose-H2S ou gélose de Kligler-Hajna (Bio-Rad...) ; il est parfois simplement dénommé milieu de Kligler (bioMérieux® SA...). Les compositions chimiques de ces milieux sont similaires et permettent de faire les mêmes tests
biochimiques.
2.2.3.1. Milieu de Kligler bioMérieux® SA
Il est utilisé principalement pour orienter l'identification des entérobactéries
(bacilles à Gram-). Il permet de mettre en évidence en 24 heures les fermentations du glucose et du lactose, la production d'hydrogène sulfuré (H->S) et de gaz
provenant de la fermentation du glucose. Jusque dans les années 1990, il a été
utilisé également pour la recherche de la lysine décarboxylase (LDC).
► Composition chimique du milieu de culture
La composition chimique de ce milieu de culture en g/L d’eau distillée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin)............................ 20
Lactose (bovin)...................................................................................... 10
Glucose...............................................................
1
Saccharose.............................................................
10
Chlorure de sodium...............................................................................
5
Citrate de fer ammoniacal.....................................................................
0,5
Thiosulfate de sodium...............................................
0,5
Rouge de phénol.........................................................
0,025
Aear.....................................................15
pH 7,3
Stérilisation à l'autoclave : 15 minutes à 118 °C