Milieux de culture et tests biochimiques pour l'identification bactérienne
131
Tableau 51 U Lecture et interprétation du test nitrate-réductases.
Coloration de la pente
du milieu
Produit formé
Test nitrateréductases (NR)1
Rouge (après une minute
environ)
no2
NR+
Entérobactéries1,
Pseudomonas
aeruginosa,
Vibrionaceae2...
Si incolore, rajouter un
peu de poudre de zinc
dans le tube de culture,
laisser sédimenter sans
agiter ; observer après 1 à
2 minutes
Coloration rose au voisinage de la
poudre de zinc :
présence de NO2, par réduction
chimique des nitrates en nitrites par le
zinc
NRPseudomonas putida,
Neisseria2...
Incolore :
nitrates complètement réduits au-delà
du « stade des nitrites » en N2 ;
présence de bulles gazeuses dans la
culture témoignant de la réduction des
nitrates en azote gazeux N2
NR+
Ps. aeruginosa...
1. De nombreux exemples de bactéries Gram-, NR+ ou NR- sont connus, mais elles ne sont pas étudiées dans
cet ouvrage.
2. Sauf exceptions.
1.4.2.
Respiration nitrates par certaines bactéries aérobies
Certaines bactéries aérobies strictes (Pseudomonas...) peuvent se développer
en anaérobiose, mais en respirant des nitrates, qui sont réduits jusqu'au « stade
N2».
De telles souches bactériennes ne se développent que dans la zone superficielle de la gélose viande-foie (cf. supra, paragraphe 1.1.2.) ne contenant pas de
nitrates alors qu’elles vont pousser sur toute la hauteur du tube dans une gélose
gélatine de Legroux.
La composition chimique de la gélose gélatine de Legroux, en g/L d’eau distillée, est la suivante :
Extrait de viande................................................................................. 2
Peptone pepsique de viande................................................................. 20
KNO3........................................................................................................
1
Glucose.................................................................................................... 10
Gélatine.................................................................................................... 35
Agar.......................................................................................................... 4
pH final 7,3 ± 0,2
Stérilisation à l’autoclave : 20 minutes à 121 °C
Ce milieu n’est plus commercialisé, mais présentant un intérêt pédagogique, il
peut être préparé au laboratoire ou remplacé par de la gélose viande-foie additionnée de nitrate de potassium à 1 %o lors de sa préparation et coulée en tubes
étroits (à raison de 7 à 8 mL par tube).
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Tableau 51 U Lecture et interprétation du test nitrate-réductases.
Coloration de la pente
du milieu
Produit formé
Test nitrateréductases (NR)1
Rouge (après une minute
environ)
no2
NR+
Entérobactéries1,
Pseudomonas
aeruginosa,
Vibrionaceae2...
Si incolore, rajouter un
peu de poudre de zinc
dans le tube de culture,
laisser sédimenter sans
agiter ; observer après 1 à
2 minutes
Coloration rose au voisinage de la
poudre de zinc :
présence de NO2, par réduction
chimique des nitrates en nitrites par le
zinc
NRPseudomonas putida,
Neisseria2...
Incolore :
nitrates complètement réduits au-delà
du « stade des nitrites » en N2 ;
présence de bulles gazeuses dans la
culture témoignant de la réduction des
nitrates en azote gazeux N2
NR+
Ps. aeruginosa...
1. De nombreux exemples de bactéries Gram-, NR+ ou NR- sont connus, mais elles ne sont pas étudiées dans
cet ouvrage.
2. Sauf exceptions.
1.4.2.
Respiration nitrates par certaines bactéries aérobies
Certaines bactéries aérobies strictes (Pseudomonas...) peuvent se développer
en anaérobiose, mais en respirant des nitrates, qui sont réduits jusqu'au « stade
N2».
De telles souches bactériennes ne se développent que dans la zone superficielle de la gélose viande-foie (cf. supra, paragraphe 1.1.2.) ne contenant pas de
nitrates alors qu’elles vont pousser sur toute la hauteur du tube dans une gélose
gélatine de Legroux.
La composition chimique de la gélose gélatine de Legroux, en g/L d’eau distillée, est la suivante :
Extrait de viande................................................................................. 2
Peptone pepsique de viande................................................................. 20
KNO3........................................................................................................
1
Glucose.................................................................................................... 10
Gélatine.................................................................................................... 35
Agar.......................................................................................................... 4
pH final 7,3 ± 0,2
Stérilisation à l’autoclave : 20 minutes à 121 °C
Ce milieu n’est plus commercialisé, mais présentant un intérêt pédagogique, il
peut être préparé au laboratoire ou remplacé par de la gélose viande-foie additionnée de nitrate de potassium à 1 %o lors de sa préparation et coulée en tubes
étroits (à raison de 7 à 8 mL par tube).