Milieux de culture et tests biochimiques pour l’identification bactérienne
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Des réactifs prêts à l’emploi sont commercialisés : « ID Color Catalase »
bioMérieux® SA (Delarras et Trébaol, 2003), Bactident" catalase VWR™ International...
1.3.
Recherche de l’oxydase - Test oxydase
L’oxydase ou Cytochrome oxydase est une enzyme présente dans certaines
chaînes respiratoires cytochromiques bactériennes.
La recherche de cette enzyme est utile dans le repérage des colonies de Neisseriaceae et dans le diagnostic des bacilles à Gram négatif (cf. tableau 50).
Tableau 50 ■ Utilité du test oxydase.
Test oxydase
Genres bactériens
Oxydase+
Aeromonas, Vibrio, Neisseria,
Flavobacterium, Pseudomonas...
OxydaseEnterobacteriaceae,
Acinetobacter, Pasteurella...
Oxydase variable
Brucella...
1.3.1. Première méthode
Prendre un tube à hémolyse contenant 0,5 mL d’eau physiologique stérile,
puis :
-faire une suspension épaisse de bactéries à partir d'une culture jeune sur
gélose ;
-ajouter un disque « Ox », imprégné de N, N, N, N-tétraméthyl-l,4-phénylène diamine.
Les bactéries produisant l’enzyme oxydase oxydent ce réactif pour tonner un
composé violet, l’indophénol ; la suspension devient alors violette après 30 à
60 secondes et la couleur persiste pendant 15 minutes environ : test oxydase+. La
coloration n’est pas modifiée dans le cas contraire.
La
photocopie non
autorisée est un
délit
1.3.2. Seconde méthode
Déposer, sur une lame porte-objet propre, un disque « Ox » et 1 imbiber avec
une goutte d’eau distillée ou d’eau physiologique stérile. Prélever une partie de
la colonie à étudier à l'aide d'une pipette Pasteur boutonnée stérile et l’étaler sur
le disque.
Une coloration violet foncé apparaît immédiatement sur le disque ou en quelques secondes puis vire au noir : test oxydase+.
En microbiologie alimentaire, la recherche de la catalase est normalisée
। (c/. norme NF ISO 7218). Des réactifs prêts à l'emploi sont commercialisés :
| «Oxydase Reagent» bioMérieux SA (Delarras et Trébaol, 2003),
o Bactident oxydase VWR™ International...
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Des réactifs prêts à l’emploi sont commercialisés : « ID Color Catalase »
bioMérieux® SA (Delarras et Trébaol, 2003), Bactident" catalase VWR™ International...
1.3.
Recherche de l’oxydase - Test oxydase
L’oxydase ou Cytochrome oxydase est une enzyme présente dans certaines
chaînes respiratoires cytochromiques bactériennes.
La recherche de cette enzyme est utile dans le repérage des colonies de Neisseriaceae et dans le diagnostic des bacilles à Gram négatif (cf. tableau 50).
Tableau 50 ■ Utilité du test oxydase.
Test oxydase
Genres bactériens
Oxydase+
Aeromonas, Vibrio, Neisseria,
Flavobacterium, Pseudomonas...
OxydaseEnterobacteriaceae,
Acinetobacter, Pasteurella...
Oxydase variable
Brucella...
1.3.1. Première méthode
Prendre un tube à hémolyse contenant 0,5 mL d’eau physiologique stérile,
puis :
-faire une suspension épaisse de bactéries à partir d'une culture jeune sur
gélose ;
-ajouter un disque « Ox », imprégné de N, N, N, N-tétraméthyl-l,4-phénylène diamine.
Les bactéries produisant l’enzyme oxydase oxydent ce réactif pour tonner un
composé violet, l’indophénol ; la suspension devient alors violette après 30 à
60 secondes et la couleur persiste pendant 15 minutes environ : test oxydase+. La
coloration n’est pas modifiée dans le cas contraire.
La
photocopie non
autorisée est un
délit
1.3.2. Seconde méthode
Déposer, sur une lame porte-objet propre, un disque « Ox » et 1 imbiber avec
une goutte d’eau distillée ou d’eau physiologique stérile. Prélever une partie de
la colonie à étudier à l'aide d'une pipette Pasteur boutonnée stérile et l’étaler sur
le disque.
Une coloration violet foncé apparaît immédiatement sur le disque ou en quelques secondes puis vire au noir : test oxydase+.
En microbiologie alimentaire, la recherche de la catalase est normalisée
। (c/. norme NF ISO 7218). Des réactifs prêts à l'emploi sont commercialisés :
| «Oxydase Reagent» bioMérieux SA (Delarras et Trébaol, 2003),
o Bactident oxydase VWR™ International...