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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
1.2.
Recherche de la catalase - Test catalase
La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies
strictes et anaérobies facultatives. Elle décompose l’eau oxygénée formée, en eau
et en oxygène qui se dégage.
La recherche de cette enzyme est utile pour différencier les bactéries appartenant aux familles des Micrococcaceae, Dermacoccaceae, Staphylococcaceae,
Streptococcaceae, Enterococcaceae (cf. annexe générale 3 « Classification phylogénique des bactéries » ; cf. deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus,
Micrococcus et ex-Micrococcus » et chapitre 10 « Streptococcus et
Enterococcus » :
-les Micrococcaceae avec les genres Micrococcus, Kocuria..., les Dermacoccaceae avec les genres Dermacoccus, Kytococcus..., les Staphylococcaceae
avec les genres Staphylococcus... possèdent la catalase et sont catalase+ ;
- les Streptococcaceae avec les genres Streptococcus et Lactococcus, les
Enterococcaceae avec les genres Enterococcus... n’ont pas la catalase et sont
catalase-.
Deux méthodes classiques permettent de rechercher cette enzyme.
1.2.1. Première méthode
Prendre un tube à hémolyse contenant 1 mL d’eau physiologique stérile :
-émulsionner une quantité suffisante d’une culture bactérienne de 24 heures
prélevée sur milieu gélosé, afin d’obtenir une suspension épaisse (turbidité
importante) ;
- ajouter 2 à 3 gouttes d'eau oxygénée à 3 % sans agiter. Attendre 1 à 2 minutes avant d'observer.
1.2.2. Seconde méthode
Prendre une lame porte objet propre. Déposer sur celle-ci une goutte d eau
oxygénée à 10 volumes et émulsionner un peu de la colonie suspecte ou de la
culture obtenue sur gélose.
1.2.3. Résultat
Effectuer le test sur les souches à caractériser et observer.
Le dégagement de bulles de gaz indique la présence de la catalase : test catalase+.
En microbiologie alimentaire, la recherche de la catalase est normalisée et le
milieu de culture ne doit pas contenir de sang (cf. norme NF ISO 7218). L'utilisation d une gélose au sang pose un problème en raison de l’activité catalasique
du sang, le résultat doit être interprété avec un sens critique (Joffin J-N et
Leyral G, 1991).
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
1.2.
Recherche de la catalase - Test catalase
La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies
strictes et anaérobies facultatives. Elle décompose l’eau oxygénée formée, en eau
et en oxygène qui se dégage.
La recherche de cette enzyme est utile pour différencier les bactéries appartenant aux familles des Micrococcaceae, Dermacoccaceae, Staphylococcaceae,
Streptococcaceae, Enterococcaceae (cf. annexe générale 3 « Classification phylogénique des bactéries » ; cf. deuxième partie, chapitre 9 « Staphylococcus,
Micrococcus et ex-Micrococcus » et chapitre 10 « Streptococcus et
Enterococcus » :
-les Micrococcaceae avec les genres Micrococcus, Kocuria..., les Dermacoccaceae avec les genres Dermacoccus, Kytococcus..., les Staphylococcaceae
avec les genres Staphylococcus... possèdent la catalase et sont catalase+ ;
- les Streptococcaceae avec les genres Streptococcus et Lactococcus, les
Enterococcaceae avec les genres Enterococcus... n’ont pas la catalase et sont
catalase-.
Deux méthodes classiques permettent de rechercher cette enzyme.
1.2.1. Première méthode
Prendre un tube à hémolyse contenant 1 mL d’eau physiologique stérile :
-émulsionner une quantité suffisante d’une culture bactérienne de 24 heures
prélevée sur milieu gélosé, afin d’obtenir une suspension épaisse (turbidité
importante) ;
- ajouter 2 à 3 gouttes d'eau oxygénée à 3 % sans agiter. Attendre 1 à 2 minutes avant d'observer.
1.2.2. Seconde méthode
Prendre une lame porte objet propre. Déposer sur celle-ci une goutte d eau
oxygénée à 10 volumes et émulsionner un peu de la colonie suspecte ou de la
culture obtenue sur gélose.
1.2.3. Résultat
Effectuer le test sur les souches à caractériser et observer.
Le dégagement de bulles de gaz indique la présence de la catalase : test catalase+.
En microbiologie alimentaire, la recherche de la catalase est normalisée et le
milieu de culture ne doit pas contenir de sang (cf. norme NF ISO 7218). L'utilisation d une gélose au sang pose un problème en raison de l’activité catalasique
du sang, le résultat doit être interprété avec un sens critique (Joffin J-N et
Leyral G, 1991).