Méthodes de travail en microbiologie
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• Le contrôle d’hygiène des surfaces permet de vérifier l'hygiène, c’est-à-dire
l’état de propreté des surfaces de travail, du matériel, des mains, des vêtements...
Les surfaces à analyser sont régulièrement nettoyées et désinfectées ; cependant, des traces d’antiseptiques et de désinfectants (ammoniums quaternaires,
dérivés phénoliques et halogénés, aldéhydes, formol, éthanol et hexachlorophène) peuvent subsister sur celles-ci.
Lors de prélèvements, ces substances viendront inhiber les micro-organismes
récoltés (bactéries, champignons) ; les milieux de culture utilisés lors du contrôle
devront donc contenir un ou plusieurs neutralisants de ces produits.
• Pour le suivi de la biocontamination microbiologique de l’air et des surfaces
et pour le contrôle microbiologique de nettoyage et de désinfection des surfaces,
plusieurs types de matériels sont proposés par les fabricants. Suivant les
applications, sont pratiquées :
- le dosage de l’ATP par bioluminescence à l’aide d’un luminomètre : Bioluminomètre Lumitester portable (Laboratoires Humeau), HY-LITE 2 VWR™
International (luminomètre portable et autonome)... ;
- l’écouvillonnage à l’aide d’écouvillons stériles prêts à l'emploi ou l'utilisation de chiffonnettes ATL® irradiées à humecter (Laboratoires Humeau)... ;
- l'utilisation par contact ou immersion de lames gélosées avec neutralisant :
Envirocheck" lames de contact VWR™ International, lames ATL (Laboratoires
Humeau)... ;
-l’utilisation par contact ou écouvillonnage de boîtes Contact prêtes à
l'emploi : Count-Tact bioMérieux® SA, boîtes de Pétri Contact ATL" (Laboratoires Humeau), Envirocheck" boîtes rodac ou contact VWR™ International...
Parmi ces techniques, deux sont présentées :
- l'une pour le suivi de la biocontamination de l'air et des surfaces en environnement industriel et hospitalier (cf infra, paragraphe 5.2.) ;
- l’autre pour le contrôle de l’état de désinfection des surfaces (cf infra, paragraphe 5.3).
• En travaux pratiques de microbiologie, ces techniques peuvent être appliquées à différentes surfaces susceptibles d'être contaminées (paillasses des salles
de travaux pratiques, lavabos, toilettes...).
5 5.2.
Boites contact
s
।
i 5.2.1. Milieux « Count-Tact »
□
C
Le protocole expérimental ci-dessous est fondé sur la fiche technique de la
| gélose Count-Tact GTS/TSA bioMérieux® SA. 11 est donné en parallèle pour la
| gélose Count-Tact irradiée 3P bioMérieux® SA (cf première partie, chapitre 2
| « Matériel du laboratoire de microbiologie », paragraphe l.l.L).
Prendre des boîtes Count-Tact GTS/TSA pour le suivi de la biocontamination des
? surfaces en environnement industriel et hospitalier. Elles peuvent être utilisées pour
établir ou réviser des techniques et des programmes de contrôle microbiologique des
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• Le contrôle d’hygiène des surfaces permet de vérifier l'hygiène, c’est-à-dire
l’état de propreté des surfaces de travail, du matériel, des mains, des vêtements...
Les surfaces à analyser sont régulièrement nettoyées et désinfectées ; cependant, des traces d’antiseptiques et de désinfectants (ammoniums quaternaires,
dérivés phénoliques et halogénés, aldéhydes, formol, éthanol et hexachlorophène) peuvent subsister sur celles-ci.
Lors de prélèvements, ces substances viendront inhiber les micro-organismes
récoltés (bactéries, champignons) ; les milieux de culture utilisés lors du contrôle
devront donc contenir un ou plusieurs neutralisants de ces produits.
• Pour le suivi de la biocontamination microbiologique de l’air et des surfaces
et pour le contrôle microbiologique de nettoyage et de désinfection des surfaces,
plusieurs types de matériels sont proposés par les fabricants. Suivant les
applications, sont pratiquées :
- le dosage de l’ATP par bioluminescence à l’aide d’un luminomètre : Bioluminomètre Lumitester portable (Laboratoires Humeau), HY-LITE 2 VWR™
International (luminomètre portable et autonome)... ;
- l’écouvillonnage à l’aide d’écouvillons stériles prêts à l'emploi ou l'utilisation de chiffonnettes ATL® irradiées à humecter (Laboratoires Humeau)... ;
- l'utilisation par contact ou immersion de lames gélosées avec neutralisant :
Envirocheck" lames de contact VWR™ International, lames ATL (Laboratoires
Humeau)... ;
-l’utilisation par contact ou écouvillonnage de boîtes Contact prêtes à
l'emploi : Count-Tact bioMérieux® SA, boîtes de Pétri Contact ATL" (Laboratoires Humeau), Envirocheck" boîtes rodac ou contact VWR™ International...
Parmi ces techniques, deux sont présentées :
- l'une pour le suivi de la biocontamination de l'air et des surfaces en environnement industriel et hospitalier (cf infra, paragraphe 5.2.) ;
- l’autre pour le contrôle de l’état de désinfection des surfaces (cf infra, paragraphe 5.3).
• En travaux pratiques de microbiologie, ces techniques peuvent être appliquées à différentes surfaces susceptibles d'être contaminées (paillasses des salles
de travaux pratiques, lavabos, toilettes...).
5 5.2.
Boites contact
s
।
i 5.2.1. Milieux « Count-Tact »
□
C
Le protocole expérimental ci-dessous est fondé sur la fiche technique de la
| gélose Count-Tact GTS/TSA bioMérieux® SA. 11 est donné en parallèle pour la
| gélose Count-Tact irradiée 3P bioMérieux® SA (cf première partie, chapitre 2
| « Matériel du laboratoire de microbiologie », paragraphe l.l.L).
Prendre des boîtes Count-Tact GTS/TSA pour le suivi de la biocontamination des
? surfaces en environnement industriel et hospitalier. Elles peuvent être utilisées pour
établir ou réviser des techniques et des programmes de contrôle microbiologique des