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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Coloration des spores bactériennes selon Rakette (colorants Merck KGaA)
Recouvrir le frottis bactérien préparé avec de l’oxalate de vert malachite et
faire bouillir pendant 20 secondes, puis laisser agir 30 secondes ou plus si nécessaire.
Rincer 30 secondes à l’eau courante, puis mettre une solution d’éosine Y pendant une minute ou une solution de safranine O pendant 30 secondes (modification technique de Witz). Rincer et sécher.
Les spores sont colorées en vert émeraude, les sporanges ou les cellules en
rouge.
4.3.5. Autres colorations
D'autres colorations utiles pour la caractérisation ou la différenciation de genres bactériens sont connues depuis longtemps :
-colorations d'Albert et d’Emst-Neisser pour la coloration des corpuscules
mélachromatiques (Corynébactéries, Neisseriaceae) ;
- colorations des vacuoles lipidiques par le Soudan noir ;
-coloration de Fontana-Tribondeau ou de Vago pour les Treponema (Treponema pallidum, agent de la syphilis) et les Leptospira (Leptospira interrogans,
agents des leptospiroses).
Ces colorations anciennes de bactériologie médicale, de pratique peu courante
ne sont pas présentées. Elles sont décrites dans d’autres ouvrages de microbiologie (Marchai et al., 1988...).
5.
Contrôle d'hygiène des surfaces de travail
5.1.
Problématique
• Les contrôles de qualité microbiologique de l’air et des surfaces sont pratiqués
dans plusieurs domaines : les hôpitaux et cliniques, l’industrie pharmaceutique et
cosmétologique, la restauration collective, l'industrie agro-alimentaire...
Ainsi :
-pour les analyses biologiques des eaux, le programme n° 100-2 du Cofrac
précise que « le contrôle de qualité interne (contrôle de l’air, des surfaces...)
apportera la preuve de la pertinence des dispositions retenues pour limiter les
contaminations » ;
pour le secteur agroalimentaire, la norme NF V 08-037 (2003)
•• Microbiologie des aliments » se rapporte aux surfaces d’environnement et au
prélèvement d échantillons destinés à l'analyse microbiologique ; la norme NF
ISO 1X593 (2004) introduit des « méthodes horizontales pour les techniques de
prélèvement sur des surfaces, au moyen de boîtes de contact et d’écouvillons ».
I n exemple de contrôle microbiologique de l ’air et des surfaces dans un laboraloire microbiologique d une société est évoqué dans la première partie, chapitre 1
( onccption du laboratoire, fonctionnement et sécurité », paragraphe 1.4.2.1.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
► Coloration des spores bactériennes selon Rakette (colorants Merck KGaA)
Recouvrir le frottis bactérien préparé avec de l’oxalate de vert malachite et
faire bouillir pendant 20 secondes, puis laisser agir 30 secondes ou plus si nécessaire.
Rincer 30 secondes à l’eau courante, puis mettre une solution d’éosine Y pendant une minute ou une solution de safranine O pendant 30 secondes (modification technique de Witz). Rincer et sécher.
Les spores sont colorées en vert émeraude, les sporanges ou les cellules en
rouge.
4.3.5. Autres colorations
D'autres colorations utiles pour la caractérisation ou la différenciation de genres bactériens sont connues depuis longtemps :
-colorations d'Albert et d’Emst-Neisser pour la coloration des corpuscules
mélachromatiques (Corynébactéries, Neisseriaceae) ;
- colorations des vacuoles lipidiques par le Soudan noir ;
-coloration de Fontana-Tribondeau ou de Vago pour les Treponema (Treponema pallidum, agent de la syphilis) et les Leptospira (Leptospira interrogans,
agents des leptospiroses).
Ces colorations anciennes de bactériologie médicale, de pratique peu courante
ne sont pas présentées. Elles sont décrites dans d’autres ouvrages de microbiologie (Marchai et al., 1988...).
5.
Contrôle d'hygiène des surfaces de travail
5.1.
Problématique
• Les contrôles de qualité microbiologique de l’air et des surfaces sont pratiqués
dans plusieurs domaines : les hôpitaux et cliniques, l’industrie pharmaceutique et
cosmétologique, la restauration collective, l'industrie agro-alimentaire...
Ainsi :
-pour les analyses biologiques des eaux, le programme n° 100-2 du Cofrac
précise que « le contrôle de qualité interne (contrôle de l’air, des surfaces...)
apportera la preuve de la pertinence des dispositions retenues pour limiter les
contaminations » ;
pour le secteur agroalimentaire, la norme NF V 08-037 (2003)
•• Microbiologie des aliments » se rapporte aux surfaces d’environnement et au
prélèvement d échantillons destinés à l'analyse microbiologique ; la norme NF
ISO 1X593 (2004) introduit des « méthodes horizontales pour les techniques de
prélèvement sur des surfaces, au moyen de boîtes de contact et d’écouvillons ».
I n exemple de contrôle microbiologique de l ’air et des surfaces dans un laboraloire microbiologique d une société est évoqué dans la première partie, chapitre 1
( onccption du laboratoire, fonctionnement et sécurité », paragraphe 1.4.2.1.