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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
4.3.4. Colorations parfois utiles
Il s’agit de colorations qui permettent d'observer trois structures facultatives
de la cellule bactérienne :
- la capsule bactérienne, à contour délimité et à consistance visqueuse qui doit
être différenciée des couches visqueuses diffuses et abondantes fabriquées par
certaines bactéries ;
- les flagelles ou cils bactériens, les premiers plus longs que les seconds, assurent une mobilité par battements et les seconds par rotation chez de nombreuses
bactéries mobiles ;
- les spores bactériennes ou endospores qui correspondent en fait à une
deuxième forme d’existence et de résistance pour certains genres bactériens.
Ces colorations sont parfois réalisées en bactériologie de routine lors de l’analyse de produits pathologiques ou pour caractériser certaines souches bactériennes.
4.3.4.1. Coloration des capsules
Les bactéries, produisant dans certaines conditions une capsule qui peut entourer une cellule bactérienne ou quelques cellules, sont alors dites « encapsulées »;
elles se rencontrent notamment chez :
- Streptococcus pneumoniae, diplocoques encapsulés de peumocoques virulents, agents de la pneumonie ;
- Klebsiella pneumoniae, coccobacilles capsulés, agents de pneumopathies;
-d'autres bactéries telles que Enterobacter aerogenes, Bacillus anthraciset
B. cereus, Clostridium perfringens...
Plusieurs méthodes de coloration permettent d’observer les capsules chez les
bactéries pathogènes précitées dans des produits pathologiques ou dans des cultures de laboratoire réalisées en milieux albumineux hypersaccharosés ou non.
Ces colorations sont en général négatives car les capsules s'imprègnent très difficilement de colorants ; en voici trois exemples :
► Premier exemple : méthode de « l’état frais » à l’encre de Chine spéciale
pour bactériologie
Déposer une goutte du produit à étudier et une petite goutte d’encre de Chine
proches 1 une de 1 autre ; puis recouvrir d'une lamelle, luter la préparation et
observer à 1 objectif x 100 à immersion. Observer les bactéries dans la partie
médiane de la préparation.
Les capsules bactériennes se présentent sous forme de halos clairs qui enveloppent les cellules bactériennes plus ou moins réfringentes et qui contrastent
as et le tond grisé de la préparation. Ces halos clairs doivent demeurer quelle que
soit la mise au point.
►
Deuxième exemple : aspect à la coloration de Gram : « Gram-sérum »
Faire une coloration de Gram Hucker (cf. supra, paragraphe 4.3.2. L) à partir
de bactéries provenant d'un produit pathologique albumineux ou de bactéries
cultivées en bouillon sérum.
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
4.3.4. Colorations parfois utiles
Il s’agit de colorations qui permettent d'observer trois structures facultatives
de la cellule bactérienne :
- la capsule bactérienne, à contour délimité et à consistance visqueuse qui doit
être différenciée des couches visqueuses diffuses et abondantes fabriquées par
certaines bactéries ;
- les flagelles ou cils bactériens, les premiers plus longs que les seconds, assurent une mobilité par battements et les seconds par rotation chez de nombreuses
bactéries mobiles ;
- les spores bactériennes ou endospores qui correspondent en fait à une
deuxième forme d’existence et de résistance pour certains genres bactériens.
Ces colorations sont parfois réalisées en bactériologie de routine lors de l’analyse de produits pathologiques ou pour caractériser certaines souches bactériennes.
4.3.4.1. Coloration des capsules
Les bactéries, produisant dans certaines conditions une capsule qui peut entourer une cellule bactérienne ou quelques cellules, sont alors dites « encapsulées »;
elles se rencontrent notamment chez :
- Streptococcus pneumoniae, diplocoques encapsulés de peumocoques virulents, agents de la pneumonie ;
- Klebsiella pneumoniae, coccobacilles capsulés, agents de pneumopathies;
-d'autres bactéries telles que Enterobacter aerogenes, Bacillus anthraciset
B. cereus, Clostridium perfringens...
Plusieurs méthodes de coloration permettent d’observer les capsules chez les
bactéries pathogènes précitées dans des produits pathologiques ou dans des cultures de laboratoire réalisées en milieux albumineux hypersaccharosés ou non.
Ces colorations sont en général négatives car les capsules s'imprègnent très difficilement de colorants ; en voici trois exemples :
► Premier exemple : méthode de « l’état frais » à l’encre de Chine spéciale
pour bactériologie
Déposer une goutte du produit à étudier et une petite goutte d’encre de Chine
proches 1 une de 1 autre ; puis recouvrir d'une lamelle, luter la préparation et
observer à 1 objectif x 100 à immersion. Observer les bactéries dans la partie
médiane de la préparation.
Les capsules bactériennes se présentent sous forme de halos clairs qui enveloppent les cellules bactériennes plus ou moins réfringentes et qui contrastent
as et le tond grisé de la préparation. Ces halos clairs doivent demeurer quelle que
soit la mise au point.
►
Deuxième exemple : aspect à la coloration de Gram : « Gram-sérum »
Faire une coloration de Gram Hucker (cf. supra, paragraphe 4.3.2. L) à partir
de bactéries provenant d'un produit pathologique albumineux ou de bactéries
cultivées en bouillon sérum.