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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
2.2.1. Technique des stries
En zone stérile, ensemencer un milieu gélosé (gélose trypcase soja, par exemple) en boîte de Pétri de la manière suivante :
- diviser la surface en 4 quadrants sur le fond de la boîte de Pétri et les numéroter de 1 à 4 ;
- déposer l'inoculum sur le bord de la boîte dans le quadrant 1 ;
- l’étaler en une large strie ;
- effectuer à l'aide d'une pipette Pasteur « boutonnée » des stries serrées sur
les quadrants 1 et 2 ;
- recommencer des stries perpendiculairement aux précédentes sur les quadrants
2 et 3, puis encore perpendiculairement aux dernières sur les quadrants 3 et 4.
F igure 2 ■ Une boîte de Pétri ensemencée par la technique des stries (photo : Christiane
Delarras).
Des variantes à cette technique des stries existent et peuvent avoir la préférence de tel ou tel laboratoire.
►
Conseils pratiques
Il faut prélever des inoculums bactériens peu importants et faire des stries
nombreuses, afin d'obtenir des colonies bien isolées (séparées). Avec des cultures bactériennes très denses, il est parfois utile de repasser la pipette Pasteur boulonnée rapidement dans la flamme après avoir ensemencé les quadrants 1 et 2, de
la laisser refroidir quelques secondes, puis de reprendre l’ensemencement des
quadrants 2 et 3.
Ensemencer par cette technique des stries plusieurs boîtes de Pétri de gélose
trypcase soja (cf. première partie, chapitre 3 «Préparation et stérilisation du
matériel et des milieux de culture ». paragraphe 4.1.1.2.) avec Escherichia coli,
Salaria niaicesccns subsp. niarcescens, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus...
Incuber les boîtes de Pétri, en position renversée (couvercle en bas), à 37 C
(ou a 30 C pour S. niarcescens subsp. niarcescens) pendant 24 heures.
()bserver les colonies isolées des souches ensemencées (cf. infra, paragraphe 4.14
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
2.2.1. Technique des stries
En zone stérile, ensemencer un milieu gélosé (gélose trypcase soja, par exemple) en boîte de Pétri de la manière suivante :
- diviser la surface en 4 quadrants sur le fond de la boîte de Pétri et les numéroter de 1 à 4 ;
- déposer l'inoculum sur le bord de la boîte dans le quadrant 1 ;
- l’étaler en une large strie ;
- effectuer à l'aide d'une pipette Pasteur « boutonnée » des stries serrées sur
les quadrants 1 et 2 ;
- recommencer des stries perpendiculairement aux précédentes sur les quadrants
2 et 3, puis encore perpendiculairement aux dernières sur les quadrants 3 et 4.
F igure 2 ■ Une boîte de Pétri ensemencée par la technique des stries (photo : Christiane
Delarras).
Des variantes à cette technique des stries existent et peuvent avoir la préférence de tel ou tel laboratoire.
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Conseils pratiques
Il faut prélever des inoculums bactériens peu importants et faire des stries
nombreuses, afin d'obtenir des colonies bien isolées (séparées). Avec des cultures bactériennes très denses, il est parfois utile de repasser la pipette Pasteur boulonnée rapidement dans la flamme après avoir ensemencé les quadrants 1 et 2, de
la laisser refroidir quelques secondes, puis de reprendre l’ensemencement des
quadrants 2 et 3.
Ensemencer par cette technique des stries plusieurs boîtes de Pétri de gélose
trypcase soja (cf. première partie, chapitre 3 «Préparation et stérilisation du
matériel et des milieux de culture ». paragraphe 4.1.1.2.) avec Escherichia coli,
Salaria niaicesccns subsp. niarcescens, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus...
Incuber les boîtes de Pétri, en position renversée (couvercle en bas), à 37 C
(ou a 30 C pour S. niarcescens subsp. niarcescens) pendant 24 heures.
()bserver les colonies isolées des souches ensemencées (cf. infra, paragraphe 4.14