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Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
En Pharmacopée, il est utilisé pour la mise en évidence du caractère anaérobie
lors de la recherche de Clostridium thermophiles (cf. deuxième partie, chapitre
« Clostridium », paragraphe 4.3.1.2).
4.1.3. Pour la conservation des souches bactériennes
Pour la conservation des souches bactériennes au laboratoire, la « gélose pour
conservation des souches bactériennes » Bio-Rad peut être utilisée. Elle est principalement destinée à la conservation des entérobactéries, mais aussi des Vibrionaceae, des Pseudomonadaceae, des Alcaligenes, des Flavobacterium et
apparentés, et éventuellement des Acinetobacter et des staphylocoques.
La composition chimique (formule type) en g/L de ce milieu de culture est :
Extrait de viande ..................................................................................
5
Peptone..................................................................................................
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar....................................................................................................... 10
pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes prêts à l’emploi.
Pour les bactéries aéroanaérobies facultatives, utiliser une culture sur milieu
gélosé (gélose nutritive ou gélose trypcase soja). A l’aide d’une anse de platine
bien chargée en germes effectuer plusieurs piqûres centrales.
Pour les bactéries aérobies, ensemencer en surface.
Incuber à 37 °C maximum pendant 24 heures.
Une souche bactérienne ainsi ensemencée dans ce milieu peut se conserver un
an à température ambiante et trois ans à + 4 °C.
4.2. Milieux d’isolement
Les milieux solides d'usage courant pour bactéries non exigeantes peuvent
servir de milieux d'isolement de bactéries à partir de produits à analyser. Mais,
en pratique, il s agit le plus souvent de milieux de culture liquides et/ou solides
sélectifs qui contribuent ou qui assurent l’isolement de bactéries à partir de produits à analyser (d'origine clinique, alimentaire...).
Cependant, certains milieux de culture de la dernière décennie sont des
milieux d isolement, qui sont en fait des « milieux de confirmation » (cf. infra,
paragraphe 4.3.3.).
Pour les milieux d isolement, la distinction ancienne entre la notion de
milieu électif» ou de «milieu sélectif» (c/. définitions, annexe générale 1
Lexique de microbiologie ») n est plus utilisée en pratique courante. On parlera
plutôt, comme dans les fiches techniques actuelles des milieux de culture des
fabricants, de «milieu d'enrichissement sélectif», de «milieu d’isolement
sélectif», de « milieu d’isolement sélectif et de différentiation »... et de leur
pouvoir sélectif.
Les techniques d isolement de ces milieux de culture sont présentées dans la première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 2).
Microbiologie pratique pour le laboratoire d’analyses ou de contrôle sanitaire
En Pharmacopée, il est utilisé pour la mise en évidence du caractère anaérobie
lors de la recherche de Clostridium thermophiles (cf. deuxième partie, chapitre
« Clostridium », paragraphe 4.3.1.2).
4.1.3. Pour la conservation des souches bactériennes
Pour la conservation des souches bactériennes au laboratoire, la « gélose pour
conservation des souches bactériennes » Bio-Rad peut être utilisée. Elle est principalement destinée à la conservation des entérobactéries, mais aussi des Vibrionaceae, des Pseudomonadaceae, des Alcaligenes, des Flavobacterium et
apparentés, et éventuellement des Acinetobacter et des staphylocoques.
La composition chimique (formule type) en g/L de ce milieu de culture est :
Extrait de viande ..................................................................................
5
Peptone..................................................................................................
Chlorure de sodium .............................................................................. 5
Agar....................................................................................................... 10
pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Ce milieu est disponible en tubes prêts à l’emploi.
Pour les bactéries aéroanaérobies facultatives, utiliser une culture sur milieu
gélosé (gélose nutritive ou gélose trypcase soja). A l’aide d’une anse de platine
bien chargée en germes effectuer plusieurs piqûres centrales.
Pour les bactéries aérobies, ensemencer en surface.
Incuber à 37 °C maximum pendant 24 heures.
Une souche bactérienne ainsi ensemencée dans ce milieu peut se conserver un
an à température ambiante et trois ans à + 4 °C.
4.2. Milieux d’isolement
Les milieux solides d'usage courant pour bactéries non exigeantes peuvent
servir de milieux d'isolement de bactéries à partir de produits à analyser. Mais,
en pratique, il s agit le plus souvent de milieux de culture liquides et/ou solides
sélectifs qui contribuent ou qui assurent l’isolement de bactéries à partir de produits à analyser (d'origine clinique, alimentaire...).
Cependant, certains milieux de culture de la dernière décennie sont des
milieux d isolement, qui sont en fait des « milieux de confirmation » (cf. infra,
paragraphe 4.3.3.).
Pour les milieux d isolement, la distinction ancienne entre la notion de
milieu électif» ou de «milieu sélectif» (c/. définitions, annexe générale 1
Lexique de microbiologie ») n est plus utilisée en pratique courante. On parlera
plutôt, comme dans les fiches techniques actuelles des milieux de culture des
fabricants, de «milieu d'enrichissement sélectif», de «milieu d’isolement
sélectif», de « milieu d’isolement sélectif et de différentiation »... et de leur
pouvoir sélectif.
Les techniques d isolement de ces milieux de culture sont présentées dans la première partie, chapitre 4 « Méthodes de travail en microbiologie », paragraphe 2).