Préparation et stérilisation du matériel et des milieux de culture
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Amphotéricine B, Triméthoprime) ; elle est alors destinée à faciliter l'isolement
du gonocoque (Neisseria gonorrhoeae) et du méningocoque (Neisseria meningitidis) en bactériologie médicale, à partir de produits pathologiques contaminés
pouvant présenter une flore polymicrobienne.
4.1.22. Gélose Columbia au sang de mouton bioMérieux' SA
La gélose Columbia est un milieu d’isolement destiné au développement de tous
les bactéries couramment rencontrées dans les prélèvements biologiques divers.
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin) .......................... 10
Hydrolysat de protéines animales (bovin ou porcin)........................ 10
Peptone de cœur (bovin ou porcin) ........................................................
3
Amidon de maïs........................................................................................
1
Chlorure de sodium .................................................................................
5
Agar .......................................................................................................... 13,5
pH 7,3
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 118 °C
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons prêts à l’emploi.
En suivant le mode opératoire du fabricant, elle peut être additionnée de 5 % de
sang de mouton ou de cheval pour la culture de bactéries exigeantes.
De surcroît, la présence de sang permet de lire le test hémolyse, utilisé dans
l’identification bactérienne (Streptococcus, Listeria...).
La gélose Columbia au sang de mouton peut être supplémentée de mélanges
d'antibiotiques tel que le mélange « Campylosel » pour l’isolement des Campylobacter (cf. deuxième partie, chapitre 3 « Campylobacter », paragraphe 4.1.2. ;
Delarras et Trébaol, 2003) ou le mélange ANC pour l’isolement de Streptococcus (cf. chapitre 10 « Streptococcus et Enterococcus », paragraphe 5.1.1.), qui la
rendent sélective.
4.12.3. Gélose Columbia Bio-Rad
Ce milieu, additionné de sang, convient à la culture des bactéries exigeantes et permet de mettre en évidence le pouvoir hémolytique de certaines bactéries. La gélose
Columbia correspond au milieu gélosé Q de la Pharmacopée européenne pour le contrôle microbiologique des produits non stériles (recherche de micro-organismes spécifiés) (cf. annexe générale 7 « Milieux de culture utilisés en Pharmacopée »).
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau distillée est :
Mélange spécial de peptones................................................................ 23
Amidon....................................................................................................
1
Chlorure de sodium ..............................................................................
5
Agar ........................................................................................................ 10
pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 121 ± 1 °C
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons prêts à l'emploi.
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Amphotéricine B, Triméthoprime) ; elle est alors destinée à faciliter l'isolement
du gonocoque (Neisseria gonorrhoeae) et du méningocoque (Neisseria meningitidis) en bactériologie médicale, à partir de produits pathologiques contaminés
pouvant présenter une flore polymicrobienne.
4.1.22. Gélose Columbia au sang de mouton bioMérieux' SA
La gélose Columbia est un milieu d’isolement destiné au développement de tous
les bactéries couramment rencontrées dans les prélèvements biologiques divers.
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d’eau purifiée est :
Peptone de caséine et de viande (bovin et porcin) .......................... 10
Hydrolysat de protéines animales (bovin ou porcin)........................ 10
Peptone de cœur (bovin ou porcin) ........................................................
3
Amidon de maïs........................................................................................
1
Chlorure de sodium .................................................................................
5
Agar .......................................................................................................... 13,5
pH 7,3
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 118 °C
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons prêts à l’emploi.
En suivant le mode opératoire du fabricant, elle peut être additionnée de 5 % de
sang de mouton ou de cheval pour la culture de bactéries exigeantes.
De surcroît, la présence de sang permet de lire le test hémolyse, utilisé dans
l’identification bactérienne (Streptococcus, Listeria...).
La gélose Columbia au sang de mouton peut être supplémentée de mélanges
d'antibiotiques tel que le mélange « Campylosel » pour l’isolement des Campylobacter (cf. deuxième partie, chapitre 3 « Campylobacter », paragraphe 4.1.2. ;
Delarras et Trébaol, 2003) ou le mélange ANC pour l’isolement de Streptococcus (cf. chapitre 10 « Streptococcus et Enterococcus », paragraphe 5.1.1.), qui la
rendent sélective.
4.12.3. Gélose Columbia Bio-Rad
Ce milieu, additionné de sang, convient à la culture des bactéries exigeantes et permet de mettre en évidence le pouvoir hémolytique de certaines bactéries. La gélose
Columbia correspond au milieu gélosé Q de la Pharmacopée européenne pour le contrôle microbiologique des produits non stériles (recherche de micro-organismes spécifiés) (cf. annexe générale 7 « Milieux de culture utilisés en Pharmacopée »).
La formule théorique de ce milieu de culture en g/L d'eau distillée est :
Mélange spécial de peptones................................................................ 23
Amidon....................................................................................................
1
Chlorure de sodium ..............................................................................
5
Agar ........................................................................................................ 10
pH 7,3 ± 0,2 à 25 °C
Stérilisation à l’autoclave : 15 minutes à 121 ± 1 °C
Ce milieu est disponible en milieu déshydraté et en flacons prêts à l'emploi.