sur l'ensemble du littoral français, les prélèvements, observations et analyses sont réalisés par chaque laboratoire pour la portion de
littoral qui le concerne. La cohérence de l'ensemble nécessite un effort permanent d'harmonisation, qui s'est récemment concrétisé
par une démarche d'assurance qualité (voir
annexe). Le plan qualité Réphy, dont un
modèle général a été rédigé en 1998, est
actuellement en cours de finalisation dans
chacun des laboratoires côtiers. Le chapitre
traitant des analyses, en particulier, a pour
but de décrire l'ensemble des actions liées à
la prise en compte des échantillons et des
analyses, du prélèvement à la gestion des
résultats. Il contient également la liste des
documents de référence décrivant les procédures à suivre et les méthodes à utiliser.
Évolution des méthodes
et analyses de confirmation
Sur les côtes françaises métropolitaines,
deux familles de phycotoxines ont présenté
jusqu'à aujourd'hui un danger pour les
consommateurs. Il s'agit des toxines diarrhéiques (acide okadaïque et ses dérivés) et
des toxines paralysantes (saxitoxine et ses
dérivés). Ces toxines sont produites respectivement par des dinoflagellés du genre Dinophysis et Alexandrium (Sournia et al., 1991).
L'acide okadaïque agit au niveau cellulaire
en inhibant les protéines-phosphatases
(PP), enzymes provoquant la déphosphorylation des protéines phosphorylées par les
protéines-kinases. Il se produit donc une
accumulation des protéines phosphorylées
donnant lieu à différents effets biologiques
indésirables : promotion tumorale, transformation de la morphologie des cellules,
contracture des muscles lisses, etc.
La saxitoxine, elle, agit directement sur les
mécanismes de transmission des influx nerveux en bloquant la perméabilité des cellules nerveuses et musculaires aux ions
sodium. Cet effet se traduit par des symptômes neurologiques, dont le plus frappant
est la paralysie des muscles respiratoires.
Le point commun entre ces toxines est la
complexité des molécules impliquées dans la
toxicité des coquillages. En effet, dans
chaque cas, l'agent toxique responsable n'est
pas une seule substance mais une famille de
dérivés dont la toxicité s'évalue par rapport à
celle de la molécule de base (acide okadaïque/
saxitoxine). De plus, ces dérivés peuvent
faire l'objet de réactions biochimiques d'interconversion, principalement dans les
coquillages et probablement également dans
le tube digestif de l'homme également.
Le profil toxinique complexe de chaque
famille de toxines continue de poser des
difficultés pour la mise au point de
méthodes appropriées de détection et de
quantification des différentes phycotoxines
dans les coquillages.
Dans le cadre de la surveillance des
coquillages, le contrôle de la salubrité passe
d'abord par une extraction des toxines avec
un solvant approprié, à partir d'une matrice
généralement très riche en protéines, lipides
et polysaccharides. La procédure d'extraction
diffère en fonction des propriétés chimiques
de chaque famille de toxines : les PSP sont
solubles dans les solvants polaires (eau,
methanol...) et les DSP dans les solvants
organiques moyennement polaires (dichlorométhane, chloroforme...). Les extraits obtenus sont prêts à être testés selon les techniques de dépistage des toxines recherchées.
Les méthodes de détection des toxines dans
les extraits de coquillages varient en fonction de la sensibilité, de la spécificité, de la
rapidité, du coût d'analyse... Actuellement,
il existe deux types de méthodes adoptées
par la plupart des pays : un test biologique
sur souris, qui met en évidence une toxicité
globale du coquillage, et l'analyse physicochimique, qui permet d'identifier et de
quantifier les phycotoxines impliquées.
Néanmoins, cette dernière méthode nécessite une étape préalable de purification de
l'extrait de départ des coquillages.
Les tests biologiques sur souris
utilisés pour la surveillance des DSP/PSP
La procédure utilisée pour les toxines PSP
est validée au niveau international comme
méthode de référence AOAC (Association
of Official Analytical Chemists, 1990). Elle
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littoral qui le concerne. La cohérence de l'ensemble nécessite un effort permanent d'harmonisation, qui s'est récemment concrétisé
par une démarche d'assurance qualité (voir
annexe). Le plan qualité Réphy, dont un
modèle général a été rédigé en 1998, est
actuellement en cours de finalisation dans
chacun des laboratoires côtiers. Le chapitre
traitant des analyses, en particulier, a pour
but de décrire l'ensemble des actions liées à
la prise en compte des échantillons et des
analyses, du prélèvement à la gestion des
résultats. Il contient également la liste des
documents de référence décrivant les procédures à suivre et les méthodes à utiliser.
Évolution des méthodes
et analyses de confirmation
Sur les côtes françaises métropolitaines,
deux familles de phycotoxines ont présenté
jusqu'à aujourd'hui un danger pour les
consommateurs. Il s'agit des toxines diarrhéiques (acide okadaïque et ses dérivés) et
des toxines paralysantes (saxitoxine et ses
dérivés). Ces toxines sont produites respectivement par des dinoflagellés du genre Dinophysis et Alexandrium (Sournia et al., 1991).
L'acide okadaïque agit au niveau cellulaire
en inhibant les protéines-phosphatases
(PP), enzymes provoquant la déphosphorylation des protéines phosphorylées par les
protéines-kinases. Il se produit donc une
accumulation des protéines phosphorylées
donnant lieu à différents effets biologiques
indésirables : promotion tumorale, transformation de la morphologie des cellules,
contracture des muscles lisses, etc.
La saxitoxine, elle, agit directement sur les
mécanismes de transmission des influx nerveux en bloquant la perméabilité des cellules nerveuses et musculaires aux ions
sodium. Cet effet se traduit par des symptômes neurologiques, dont le plus frappant
est la paralysie des muscles respiratoires.
Le point commun entre ces toxines est la
complexité des molécules impliquées dans la
toxicité des coquillages. En effet, dans
chaque cas, l'agent toxique responsable n'est
pas une seule substance mais une famille de
dérivés dont la toxicité s'évalue par rapport à
celle de la molécule de base (acide okadaïque/
saxitoxine). De plus, ces dérivés peuvent
faire l'objet de réactions biochimiques d'interconversion, principalement dans les
coquillages et probablement également dans
le tube digestif de l'homme également.
Le profil toxinique complexe de chaque
famille de toxines continue de poser des
difficultés pour la mise au point de
méthodes appropriées de détection et de
quantification des différentes phycotoxines
dans les coquillages.
Dans le cadre de la surveillance des
coquillages, le contrôle de la salubrité passe
d'abord par une extraction des toxines avec
un solvant approprié, à partir d'une matrice
généralement très riche en protéines, lipides
et polysaccharides. La procédure d'extraction
diffère en fonction des propriétés chimiques
de chaque famille de toxines : les PSP sont
solubles dans les solvants polaires (eau,
methanol...) et les DSP dans les solvants
organiques moyennement polaires (dichlorométhane, chloroforme...). Les extraits obtenus sont prêts à être testés selon les techniques de dépistage des toxines recherchées.
Les méthodes de détection des toxines dans
les extraits de coquillages varient en fonction de la sensibilité, de la spécificité, de la
rapidité, du coût d'analyse... Actuellement,
il existe deux types de méthodes adoptées
par la plupart des pays : un test biologique
sur souris, qui met en évidence une toxicité
globale du coquillage, et l'analyse physicochimique, qui permet d'identifier et de
quantifier les phycotoxines impliquées.
Néanmoins, cette dernière méthode nécessite une étape préalable de purification de
l'extrait de départ des coquillages.
Les tests biologiques sur souris
utilisés pour la surveillance des DSP/PSP
La procédure utilisée pour les toxines PSP
est validée au niveau international comme
méthode de référence AOAC (Association
of Official Analytical Chemists, 1990). Elle
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