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• La T4 polynucleotide kinase : elle transfère ou échange le phosphate situé en
position gamma (position la plus externe) de la molécule d’ATP sur le phosphate en 5'
d'un polynucleotide ADN ou ARN. La polynucléotide kinase est utilisée au
laboratoire pour incorporer du phosphate radioactif ( 32 P) sur l’extrémité 5’
d’un acide nucléique, soit par transfert, soit par échange.
• La transférase terminale catalyse l’addition de désoxynucléotides sur une fonction
alcool 3’OH terminale de l’ADN. L’enzyme préfère les molécules d’ADN dont
l’extrémité 3’OH est sortante, mais il existe des conditions qui favorisent la catalyse
sur l’ADN à bouts francs, voire sur les extrémités 3’OH rentrantes. Elle incorpore plus
spécifiquement les purines ou les pyrimidines en fonction du cation divalent qu’on lui
donne comme cofacteur : Mg
++ pour les purines, Co
++ pour les pyrimidines ou encore
Mn
++ .
• La transférase terminale est utilisée au laboratoire pour :
• construire des séquences polymérisées de nucléotides (queues) à l’extrémité
3’OH de l’ADN (en vue du clonage des fragments d’ADN) ;
• marquer les extrémités 3’ de l’ADN avec un nucléotide marqué sur le
phosphate α ;
• ajouter un nucléotide à la fin d’une séquence pour induire une mutation
(mutagénèse dirigée).
2.5- Les topo-isomérases
L’état physiologique de l'ADN est la forme super enroulée. Les topo-isomérases sont capables
de changer cette conformation. Ces enzymes sont surtout importantes pour l'étude de la
réplication de l'ADN