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Les plus couramment utilisés en génie génétique sont:
 ADN polymérase I
Extraite d'Escherichia coli, elle joue un rôle majeur dans la réparation de l'ADN. Grâce à son
activité polymérasique et exonucléasique, l'enzyme se fixe à une région monobrin et
synthétise totalement le brin complémentaire en dégradant au fur et à mesure la partie
existante du brin.
L'activité polymérasique s'effectue dans le sens 5' vers 3' à partir d'une amorce 3'OH. Alors
que l’activité exonucléasique se trouve dans les deux sens. L'ADN synthétisé est strictement
complémentaire de la matrice.
 Fragment de Klenow
C'est un sous fragment de l’ADN Polymérase I. Il ne possède pas d'activité nucléasique 5’-3’.
 Taq polymérase :
Extraite à partir d’une bactérie Thermus aquaticus, active à 70°C. Elle est très utilisée dans les
réactions d'amplification génique et également dans les réactions de séquençage de l'ADN. En
principe, elle est dépourvue de l'activité exonucléasique 3' à 5'.
 Transcriptase réverse ou rétrotranscriptase
Codée par les gènes Pol des rétrovirus, cette enzyme, ARN-dépendante, transcrit ARNm en
ADN complémentaire (cADN).
C’est une ADN polymérase, elle travaille dans le sens 5' vers 3‘. Elle est dépourvue d’activité
exonucléasique 3’à 5’. Elle a également une activité RNAse.
2.4. Enzymes modifiant l'ADN
De nombreuses enzymes modifient l'ADN par addition ou suppression de groupes chimiques
spécifiques. Les principales sont :
• La phosphatase alcaline : elle retire le phosphate en 5' sur l'ADN, l'ARN et les
nucléotides libres. L'élimination des phosphates en 5' empêche toute action des
ligases.
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Biologie moléculaire et génie génétique 2: support de cours - 19/76

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