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Les plus couramment utilisés en génie génétique sont:
ADN polymérase I
Extraite d'Escherichia coli, elle joue un rôle majeur dans la réparation de l'ADN. Grâce à son
activité polymérasique et exonucléasique, l'enzyme se fixe à une région monobrin et
synthétise totalement le brin complémentaire en dégradant au fur et à mesure la partie
existante du brin.
L'activité polymérasique s'effectue dans le sens 5' vers 3' à partir d'une amorce 3'OH. Alors
que l’activité exonucléasique se trouve dans les deux sens. L'ADN synthétisé est strictement
complémentaire de la matrice.
Fragment de Klenow
C'est un sous fragment de l’ADN Polymérase I. Il ne possède pas d'activité nucléasique 5’-3’.
Taq polymérase :
Extraite à partir d’une bactérie Thermus aquaticus, active à 70°C. Elle est très utilisée dans les
réactions d'amplification génique et également dans les réactions de séquençage de l'ADN. En
principe, elle est dépourvue de l'activité exonucléasique 3' à 5'.
Transcriptase réverse ou rétrotranscriptase
Codée par les gènes Pol des rétrovirus, cette enzyme, ARN-dépendante, transcrit ARNm en
ADN complémentaire (cADN).
C’est une ADN polymérase, elle travaille dans le sens 5' vers 3‘. Elle est dépourvue d’activité
exonucléasique 3’à 5’. Elle a également une activité RNAse.
2.4. Enzymes modifiant l'ADN
De nombreuses enzymes modifient l'ADN par addition ou suppression de groupes chimiques
spécifiques. Les principales sont :
• La phosphatase alcaline : elle retire le phosphate en 5' sur l'ADN, l'ARN et les
nucléotides libres. L'élimination des phosphates en 5' empêche toute action des
ligases.
Les plus couramment utilisés en génie génétique sont:
ADN polymérase I
Extraite d'Escherichia coli, elle joue un rôle majeur dans la réparation de l'ADN. Grâce à son
activité polymérasique et exonucléasique, l'enzyme se fixe à une région monobrin et
synthétise totalement le brin complémentaire en dégradant au fur et à mesure la partie
existante du brin.
L'activité polymérasique s'effectue dans le sens 5' vers 3' à partir d'une amorce 3'OH. Alors
que l’activité exonucléasique se trouve dans les deux sens. L'ADN synthétisé est strictement
complémentaire de la matrice.
Fragment de Klenow
C'est un sous fragment de l’ADN Polymérase I. Il ne possède pas d'activité nucléasique 5’-3’.
Taq polymérase :
Extraite à partir d’une bactérie Thermus aquaticus, active à 70°C. Elle est très utilisée dans les
réactions d'amplification génique et également dans les réactions de séquençage de l'ADN. En
principe, elle est dépourvue de l'activité exonucléasique 3' à 5'.
Transcriptase réverse ou rétrotranscriptase
Codée par les gènes Pol des rétrovirus, cette enzyme, ARN-dépendante, transcrit ARNm en
ADN complémentaire (cADN).
C’est une ADN polymérase, elle travaille dans le sens 5' vers 3‘. Elle est dépourvue d’activité
exonucléasique 3’à 5’. Elle a également une activité RNAse.
2.4. Enzymes modifiant l'ADN
De nombreuses enzymes modifient l'ADN par addition ou suppression de groupes chimiques
spécifiques. Les principales sont :
• La phosphatase alcaline : elle retire le phosphate en 5' sur l'ADN, l'ARN et les
nucléotides libres. L'élimination des phosphates en 5' empêche toute action des
ligases.
