Aucun des travaux précédents n’a permis de déterminer définitivement l’origine microbienne, digestive ou mixte de la cellulolyse. Nous avons donc étudié le rôle éventuel des
microflores du tube digestif et de l’environnement immédiat dans ce phénomène, ainsi que
les relations pouvant exister entre ces deux microflores dont nous donnons les
caractéristiques.
MATÉRIEL ET MÉTHODES
Les mollusques utilisés proviennent de la rade de Brest. Les expériences sont réalisées au
laboratoire, à l’obscurité et à deux températures, 10 et 20°C. Nous avons procédé, dans
des conditions aseptiques, à deux types d’expérimentation, les unes sur des appareils
digestifs, les autres sur des animaux maintenus vivants dans des fioles sous courant d’air
stérile. Après dissection, nous avons ligaturé les extrémités des tubes digestifs. Le milieu
expérimental est constitué par de l’eau de mer artificielle préparée selon la formule de
Lyman et Fleming (1940). Les tubes digestifs sont incubés à pH 6,43. Cette valeur est
choisie après mesure du pH interne de ces tubes digestifs à l’aide de microélectrodes. Nous
avons introduit dans l’appareil digestif ou dans l’environnement des mollusques de l’eau
de mer à 5 g/l de carboxyméthylcellulose (CMC) associée le cas échéant avec des
antibiotiques comme l’azide de sodium (ANa) à 100 mg/l, inhibiteur de la microflore
aérobie ou le chloramphénicol (300 mg/l). Ce dernier s’est révélé plus efficace que la
colistine, la pénicilline G, la streptomycine, la sulfométhoxypyridazine et la tétracycline,
lors de tests préliminaires sur une collection de souches cellulolytiques issues des Teredo.
Selon le type d’expérience, nous avons pris comme témoin soit un tube digestif, soit
l’environnement d’un Teredo non traité. Les expériences ont été répétées six fois entre juin
1983 et mai 1984 tant au niveau du tube digestif que dans l’environnement des Teredo.
Cette série de mesures permet de confirmer la répétitivité de nos résultats qui se révèlent
peu dépendants de la saison. La quantité de sucres réducteurs libérés est mesurée toutes
les 24 h pendant 72 h selon la méthode de l’acide dinitrosalicylique (Miller, 1959). Les
dosages ont été faits à l’extérieur des tubes digestifs et dans l’environnement des Teredo et,
en fin d’expérience, à partir de broyats de Teredo clarifiés par centrifugation (5 000 g, 15
mn, 4°C). Nous avons exprimé les résultats en millimoles d’équivalent glucose rapportées
à 1 gramme de mollusque. L’activité cellulose-dépolymérase est mesurée selon la technique viscosimétrique de Cooper (1977).
A partir d’un tube digestif et de la galerie d’un Teredo, les souches potentiellement
cellulolytiques sont isolées sur deux milieux gélosés, l’un préparé avec de la cellulose
soluble (CMC), l’autre avec de la cellulose insoluble (Whatman 3 M). Ces deux types de
milieux ont été préparés selon les techniques de Deschamps et Lebeault (1980). Au cours
des expériences, l’évolution des populations bactériennes est suivie par la méthode des
dilutions sur le milieu 2216E d’Oppenheimer et Zobell (1952) et sur un milieu gélosé à
CMC. L’incubation est de huit jours à 20°C et à l’obscurité. La microflore de l’environnement immédiat des Teredo, entraînée par rinçage des mollusques, est incubée à 10°C en
présence d’une source de carbone à 1 g/l d’eau de mer artificielle. Les sucres utilisés sont
l’arabinose, le cellobiose, le galactose, le mannose et le xylose. La flore dénombrée est
aérobie mais il n’est pas exclu que certaines souches soient anaérobies facultatives.
RÉSULTATS ET COMMENTAIRE
Influence de deux antibiotiques sur la microflore et la cellulolyse dans le tube digestif de
Teredo navalis L. (PL 1 et Tab. 1)
Les résultats exposés proviennent d’une expérience réalisée en mars 1984. A 10°C, de 24 à
436
microflores du tube digestif et de l’environnement immédiat dans ce phénomène, ainsi que
les relations pouvant exister entre ces deux microflores dont nous donnons les
caractéristiques.
MATÉRIEL ET MÉTHODES
Les mollusques utilisés proviennent de la rade de Brest. Les expériences sont réalisées au
laboratoire, à l’obscurité et à deux températures, 10 et 20°C. Nous avons procédé, dans
des conditions aseptiques, à deux types d’expérimentation, les unes sur des appareils
digestifs, les autres sur des animaux maintenus vivants dans des fioles sous courant d’air
stérile. Après dissection, nous avons ligaturé les extrémités des tubes digestifs. Le milieu
expérimental est constitué par de l’eau de mer artificielle préparée selon la formule de
Lyman et Fleming (1940). Les tubes digestifs sont incubés à pH 6,43. Cette valeur est
choisie après mesure du pH interne de ces tubes digestifs à l’aide de microélectrodes. Nous
avons introduit dans l’appareil digestif ou dans l’environnement des mollusques de l’eau
de mer à 5 g/l de carboxyméthylcellulose (CMC) associée le cas échéant avec des
antibiotiques comme l’azide de sodium (ANa) à 100 mg/l, inhibiteur de la microflore
aérobie ou le chloramphénicol (300 mg/l). Ce dernier s’est révélé plus efficace que la
colistine, la pénicilline G, la streptomycine, la sulfométhoxypyridazine et la tétracycline,
lors de tests préliminaires sur une collection de souches cellulolytiques issues des Teredo.
Selon le type d’expérience, nous avons pris comme témoin soit un tube digestif, soit
l’environnement d’un Teredo non traité. Les expériences ont été répétées six fois entre juin
1983 et mai 1984 tant au niveau du tube digestif que dans l’environnement des Teredo.
Cette série de mesures permet de confirmer la répétitivité de nos résultats qui se révèlent
peu dépendants de la saison. La quantité de sucres réducteurs libérés est mesurée toutes
les 24 h pendant 72 h selon la méthode de l’acide dinitrosalicylique (Miller, 1959). Les
dosages ont été faits à l’extérieur des tubes digestifs et dans l’environnement des Teredo et,
en fin d’expérience, à partir de broyats de Teredo clarifiés par centrifugation (5 000 g, 15
mn, 4°C). Nous avons exprimé les résultats en millimoles d’équivalent glucose rapportées
à 1 gramme de mollusque. L’activité cellulose-dépolymérase est mesurée selon la technique viscosimétrique de Cooper (1977).
A partir d’un tube digestif et de la galerie d’un Teredo, les souches potentiellement
cellulolytiques sont isolées sur deux milieux gélosés, l’un préparé avec de la cellulose
soluble (CMC), l’autre avec de la cellulose insoluble (Whatman 3 M). Ces deux types de
milieux ont été préparés selon les techniques de Deschamps et Lebeault (1980). Au cours
des expériences, l’évolution des populations bactériennes est suivie par la méthode des
dilutions sur le milieu 2216E d’Oppenheimer et Zobell (1952) et sur un milieu gélosé à
CMC. L’incubation est de huit jours à 20°C et à l’obscurité. La microflore de l’environnement immédiat des Teredo, entraînée par rinçage des mollusques, est incubée à 10°C en
présence d’une source de carbone à 1 g/l d’eau de mer artificielle. Les sucres utilisés sont
l’arabinose, le cellobiose, le galactose, le mannose et le xylose. La flore dénombrée est
aérobie mais il n’est pas exclu que certaines souches soient anaérobies facultatives.
RÉSULTATS ET COMMENTAIRE
Influence de deux antibiotiques sur la microflore et la cellulolyse dans le tube digestif de
Teredo navalis L. (PL 1 et Tab. 1)
Les résultats exposés proviennent d’une expérience réalisée en mars 1984. A 10°C, de 24 à
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