Chapitre II : Matériel et méthodes
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produits par la lecithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune d'œuf). Leur taille est de 0,5 à
2 mm, avec un aspect brillant.
4.2.5.4. Test de confirmation
- Effectuer le test de la catalase avec la colonie typique de S.aureus par la mise en suspension
sur une lame dans une goutte de peroxyde d’oxygène. La formation de bulles indique une
réaction positive.
- Repiquer quelques colonies suspectes dans le bouillon cœur cervelle
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé et bien homogénéisé, à 37°C, pendant 24 heures.
- Effectuer le Test de Coagulase, en transférant 0,5 ml de chaque culture précédemment
incubée en cœur cervelle à 0,5 ml de plasma de lapin dans des cloches de Durham
- Incuber, à 37°C et Lire après 5 à 24 heures.
- S’il y a formation d’un culot ferme, le Test de la Coagulase est dit positif et donc présence
de Staphylococcus aureus, sinon le test est négatif et alors absence de Staphylococcus aureus
dans l’échantillon analysé.
4.2.6. Recherche des Salmonelles
4.2.6.1. Définition
Les salmonelles appartiennent à la famille des entérobactéries, aérobies et facultativement
anaérobies, oxydase négative, catalase positive, dégradant les glucides du métabolisme
fermentatif, intervenant dans divers types d'intoxications alimentaires (Bourgeois et
al.,1980).
4.2.6.2. Mode opératoire
La recherche des salmonelles nécessite les étapes successives indiquées ci-dessous.
Etape 1 : Pré-enrichissement
Cette étape est nécessaire car elle va permettre aux germes présents dans le produit de
reprendre leur vitalité.
- mélanger 25g de la chair de chaque échantillon dans 225ml du milieu liquide sélectif Eau
Peptonée Tamponnée (EPT), après broyage et homogénéisation.
- Incuber à 37°C pendant 24h.
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produits par la lecithinase qui hydrolyse la lécithine du jaune d'œuf). Leur taille est de 0,5 à
2 mm, avec un aspect brillant.
4.2.5.4. Test de confirmation
- Effectuer le test de la catalase avec la colonie typique de S.aureus par la mise en suspension
sur une lame dans une goutte de peroxyde d’oxygène. La formation de bulles indique une
réaction positive.
- Repiquer quelques colonies suspectes dans le bouillon cœur cervelle
- Incuber, l’ensemble ainsi préparé et bien homogénéisé, à 37°C, pendant 24 heures.
- Effectuer le Test de Coagulase, en transférant 0,5 ml de chaque culture précédemment
incubée en cœur cervelle à 0,5 ml de plasma de lapin dans des cloches de Durham
- Incuber, à 37°C et Lire après 5 à 24 heures.
- S’il y a formation d’un culot ferme, le Test de la Coagulase est dit positif et donc présence
de Staphylococcus aureus, sinon le test est négatif et alors absence de Staphylococcus aureus
dans l’échantillon analysé.
4.2.6. Recherche des Salmonelles
4.2.6.1. Définition
Les salmonelles appartiennent à la famille des entérobactéries, aérobies et facultativement
anaérobies, oxydase négative, catalase positive, dégradant les glucides du métabolisme
fermentatif, intervenant dans divers types d'intoxications alimentaires (Bourgeois et
al.,1980).
4.2.6.2. Mode opératoire
La recherche des salmonelles nécessite les étapes successives indiquées ci-dessous.
Etape 1 : Pré-enrichissement
Cette étape est nécessaire car elle va permettre aux germes présents dans le produit de
reprendre leur vitalité.
- mélanger 25g de la chair de chaque échantillon dans 225ml du milieu liquide sélectif Eau
Peptonée Tamponnée (EPT), après broyage et homogénéisation.
- Incuber à 37°C pendant 24h.