Chapitre III : MATERIEL ET METHODES
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La matière à analyser est exposée à des fréquences de rayonnement ultraviolet spécifique, qui
excitent les molécules aromatiques. Celles-ci émettent alors une lumière de plus basse énergie
(fluorescence) qui peut être détectée par le spectromètre. La réponse de fluorescence des
substances excitées est fonction de leur structure moléculaire. Elle ne s’applique qu’aux
molécules qui possèdent des liaisons doubles conjuguées, par conséquent aux hydrocarbures
aromatiques des pétroles et parmi les composés les plus fluorescents figurent les hydrocarbures
polyaromatiques (MARCHAND, 1983).
5.1.4.2. Présentation de l’appareil d’analyse (le Spectrofluorimètre)
L’appareil d’analyse utilisé est un Spectrofluorimètre HITACHI modèle 650-10s, équipé d’une
lampe à Xénon qui représente la source lumineuse la plus performante avec des fentes de 1,5 nm
à 20 nm, un monochromateur d’excitation, un balayage allant de 220 à 830 nm grâce à un
monochromateur d’émission (car après excitation, l’échantillon émet dans toutes les directions),
un photomultiplicateur (qui transforme la lumière émise en courant électrique) et un système de
lecture du signal.
L’appareil fonctionne avec des cellules en quartz de 1 cm de trajet optique, polies sur les quatre
faces. Un volume minimal de 0,5 ml d’échantillon est suffisant à l’analyse.
Figure III.6 : Spectrofluorimètre à rayonnement ultraviolet HITACHI 650-10s
5.1.4.3. Étalonnage est préparation des standards
La matière extraite de l'eau de mer n'est pas constituée par du "pétrole" mais par l'accumulation
des produits de la dégradation du pétrole, parfois accompagnés de composés aromatiques non
polaires dérivés d'autres sources. Étant donné la complexité de cette matière et son caractère mal
défini à l'heure actuelle, il est recommandé aux laboratoires d'utiliser le Chrysène (C 18 H 12 )
comme principale substance de référence. D'autres produits pétroliers étant également utilisables
le cas échéant (COI, 1983).
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La matière à analyser est exposée à des fréquences de rayonnement ultraviolet spécifique, qui
excitent les molécules aromatiques. Celles-ci émettent alors une lumière de plus basse énergie
(fluorescence) qui peut être détectée par le spectromètre. La réponse de fluorescence des
substances excitées est fonction de leur structure moléculaire. Elle ne s’applique qu’aux
molécules qui possèdent des liaisons doubles conjuguées, par conséquent aux hydrocarbures
aromatiques des pétroles et parmi les composés les plus fluorescents figurent les hydrocarbures
polyaromatiques (MARCHAND, 1983).
5.1.4.2. Présentation de l’appareil d’analyse (le Spectrofluorimètre)
L’appareil d’analyse utilisé est un Spectrofluorimètre HITACHI modèle 650-10s, équipé d’une
lampe à Xénon qui représente la source lumineuse la plus performante avec des fentes de 1,5 nm
à 20 nm, un monochromateur d’excitation, un balayage allant de 220 à 830 nm grâce à un
monochromateur d’émission (car après excitation, l’échantillon émet dans toutes les directions),
un photomultiplicateur (qui transforme la lumière émise en courant électrique) et un système de
lecture du signal.
L’appareil fonctionne avec des cellules en quartz de 1 cm de trajet optique, polies sur les quatre
faces. Un volume minimal de 0,5 ml d’échantillon est suffisant à l’analyse.
Figure III.6 : Spectrofluorimètre à rayonnement ultraviolet HITACHI 650-10s
5.1.4.3. Étalonnage est préparation des standards
La matière extraite de l'eau de mer n'est pas constituée par du "pétrole" mais par l'accumulation
des produits de la dégradation du pétrole, parfois accompagnés de composés aromatiques non
polaires dérivés d'autres sources. Étant donné la complexité de cette matière et son caractère mal
défini à l'heure actuelle, il est recommandé aux laboratoires d'utiliser le Chrysène (C 18 H 12 )
comme principale substance de référence. D'autres produits pétroliers étant également utilisables
le cas échéant (COI, 1983).