Matériels et méthodes
42
En spectrophotométrie d’absorption, la grandeur physique observée est le flux lumineux reçu
par un détecteur de photons (Benedetto, 1997).
c. Etalonnage
Pour chaque élément à doser on prépare une gamme d’étalons dans les mêmes conditions des
échantillons, à différentes concentrations (en fonction du type de métal).
Les absorbances de ces solutions standards sont mesurées, ce qui permet de tracer la courbe
d’étalonnage (absorbance = f (concentration)), pour les faibles concentrations, c'est- à-dire pour
les faibles absorbances, la courbe est quasi linéaire, donc de la forme :
Y =a X + b
Où : Y : Densité optique (DO).
X : Concentration du métal à analyser.
a : Pente de la courbe.
b : Ordonnée à l’origine.
A l’aide de la droite d’étalonnage, nous pouvons déterminer les concentrations inconnues en
métaux des échantillons de poissons à analyser.
d. Calcul des concentrations des métaux
La concentration du métal dans l’échantillon minéralisé est obtenue à partir de la droite
d’étalonnage par une régression linéaire aux moindres carrés.
Détermination de la concentration au niveau des échantillons
La concentration du métal dans l’organisme est calculée selon la formule suivante (Asso, 1982).
Cfinale =Cx-Cb*V/P
Où : C finale : Concentration du métal dans l’échantillon (μg/g).
Cx : Concentration du métal présent dans l’analyte (μg/ml).
Cb : Concentration du blanc (μg/ml).
V : Volume de dilution (ml).
P : Poids sec de l’échantillon biologique minéralisé (g).
2.4. Analyse biochimique : Méthodes d’analyse des protéines, lipides et glucides
Le dosage des protéines, lipides et glucides a été réalisé au laboratoire de chimie et de biochimie
de l’Ecole Nationale Supérieure des Sciences de la Mer et de l’Aménagement du Littoral
« ENSSMAL ».
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En spectrophotométrie d’absorption, la grandeur physique observée est le flux lumineux reçu
par un détecteur de photons (Benedetto, 1997).
c. Etalonnage
Pour chaque élément à doser on prépare une gamme d’étalons dans les mêmes conditions des
échantillons, à différentes concentrations (en fonction du type de métal).
Les absorbances de ces solutions standards sont mesurées, ce qui permet de tracer la courbe
d’étalonnage (absorbance = f (concentration)), pour les faibles concentrations, c'est- à-dire pour
les faibles absorbances, la courbe est quasi linéaire, donc de la forme :
Y =a X + b
Où : Y : Densité optique (DO).
X : Concentration du métal à analyser.
a : Pente de la courbe.
b : Ordonnée à l’origine.
A l’aide de la droite d’étalonnage, nous pouvons déterminer les concentrations inconnues en
métaux des échantillons de poissons à analyser.
d. Calcul des concentrations des métaux
La concentration du métal dans l’échantillon minéralisé est obtenue à partir de la droite
d’étalonnage par une régression linéaire aux moindres carrés.
Détermination de la concentration au niveau des échantillons
La concentration du métal dans l’organisme est calculée selon la formule suivante (Asso, 1982).
Cfinale =Cx-Cb*V/P
Où : C finale : Concentration du métal dans l’échantillon (μg/g).
Cx : Concentration du métal présent dans l’analyte (μg/ml).
Cb : Concentration du blanc (μg/ml).
V : Volume de dilution (ml).
P : Poids sec de l’échantillon biologique minéralisé (g).
2.4. Analyse biochimique : Méthodes d’analyse des protéines, lipides et glucides
Le dosage des protéines, lipides et glucides a été réalisé au laboratoire de chimie et de biochimie
de l’Ecole Nationale Supérieure des Sciences de la Mer et de l’Aménagement du Littoral
« ENSSMAL ».