Chapitre II
MATERIEL ET METHODES
23
- Bi-distillateur MILLI-Q
® Reagent Water System, balance, spatules, béchers et étuve ;
- Deux micropipettes Fortuna
®
avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL, une de 200
à1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl ;
- Des fioles de 100 et 500 ml.
Le dosage des nitrites Le dosage de NO 2
-
repose sur l’obtention d’un composé final coloré
en rose, obtenu par réaction de nitrite tout d’abord avec le sulfanilamide (formation d’un
diazoïque), puis avec le N-naphtyl-éthylènediamine, en milieu acide (pH < 2). Dont l'absorbance
à 540 nm est proportionnelle à la concentration des ions nitrite. (AMINOT et KEROUEL,
2007)
3.4.1 Dosage des nitrates
Le nitrate est dosé après réduction quantitative en nitrite, la réduction est effectuée par contact
avec le cadmium amalgamé au cuivre (AMINOT et KEROUEL, 2007).
Les nitrites formés sont dosés selon la méthode de colorimétrique classique de Benshneider et
Robinson, (1952). La réduction des nitrates en nitrites puis le dosage des nitrites sont exécutés
automatiquement en série.
3.4.2 Dosage des orthophosphates
La méthode de dosage adopté par (MURPHY et RILEY, 1962) repose sur la réaction du
phosphate avec le molybdate d’ammonium en présence d’antimoine, pour former le complexe
phosphomolybdique, qui est ensuite réduit par l’acide ascorbique en un composé bleu. La
réaction est catalysée à une température de 37 °C, pour éviter l’effet de l’acidité sur la cinétique
de la réaction, et un pH fortement acide (pH ~ 0,8). La mesure de l’absorbance est effectuée à la
longueur d’onde 820nm. (AMINOT et KEROUEL, 2004).
Préparation des solutions d’étalonnage
Cette opération nécessite la préparation des gammes des standards à partir d’une solution mère
puis des solutions filles pour chaque élément à analyser pour que l’auto-analyseur puisse tracer
la courbe d’étalonnage (Annexe1).
4
Analyse bactériologique
L’analyse bactériologique de nos échantillons a pour objectif de déterminer la qualité des eaux
de baignade. Elle a été réalisée par la méthode de filtration.
MATERIEL ET METHODES
23
- Bi-distillateur MILLI-Q
® Reagent Water System, balance, spatules, béchers et étuve ;
- Deux micropipettes Fortuna
®
avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL, une de 200
à1000 μl et l’autre de 20 à 250 μl ;
- Des fioles de 100 et 500 ml.
Le dosage des nitrites Le dosage de NO 2
-
repose sur l’obtention d’un composé final coloré
en rose, obtenu par réaction de nitrite tout d’abord avec le sulfanilamide (formation d’un
diazoïque), puis avec le N-naphtyl-éthylènediamine, en milieu acide (pH < 2). Dont l'absorbance
à 540 nm est proportionnelle à la concentration des ions nitrite. (AMINOT et KEROUEL,
2007)
3.4.1 Dosage des nitrates
Le nitrate est dosé après réduction quantitative en nitrite, la réduction est effectuée par contact
avec le cadmium amalgamé au cuivre (AMINOT et KEROUEL, 2007).
Les nitrites formés sont dosés selon la méthode de colorimétrique classique de Benshneider et
Robinson, (1952). La réduction des nitrates en nitrites puis le dosage des nitrites sont exécutés
automatiquement en série.
3.4.2 Dosage des orthophosphates
La méthode de dosage adopté par (MURPHY et RILEY, 1962) repose sur la réaction du
phosphate avec le molybdate d’ammonium en présence d’antimoine, pour former le complexe
phosphomolybdique, qui est ensuite réduit par l’acide ascorbique en un composé bleu. La
réaction est catalysée à une température de 37 °C, pour éviter l’effet de l’acidité sur la cinétique
de la réaction, et un pH fortement acide (pH ~ 0,8). La mesure de l’absorbance est effectuée à la
longueur d’onde 820nm. (AMINOT et KEROUEL, 2004).
Préparation des solutions d’étalonnage
Cette opération nécessite la préparation des gammes des standards à partir d’une solution mère
puis des solutions filles pour chaque élément à analyser pour que l’auto-analyseur puisse tracer
la courbe d’étalonnage (Annexe1).
4
Analyse bactériologique
L’analyse bactériologique de nos échantillons a pour objectif de déterminer la qualité des eaux
de baignade. Elle a été réalisée par la méthode de filtration.