ІІ. Matériel et méthodes
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ІІ.5.2.Test de la catalase
Cette enzyme catalyse la décomposition du peroxyde d’hydrogène (H2O2) qui est produit par
certaines réactions cellulaires et il est très toxique, donc c’est l’une des enzymes chargées d’éponger
l’eau oxygénée par la dismutation (Pelmont, 1993). La réaction catalysée est la suivante :
2H2O2
O2 + 2H2O
Le test de la catalase consiste essentiellement à ajouter du peroxyde d’hydrogène à des bactéries :
la présence de catalase donne lieu à l’apparition de bulles d’oxygène.
ІІ.5.3. Test d’oxydase
Le test oxydase est réalisé par le dépôt d’un inoculum bactérien sur le
disque d’oxydase. La présence du cytochrome oxydase se traduit par
l’apparition d’une coloration violette.
ІІ.5.4.Identification par la méthode des galeries API
a-Principe
La galerie API 20E est un système d’identification des bacilles à gram négatif. Elle comporte 20 tests
biochimiques standardisés et miniaturisé. Les milieux desséchés sont réhydratés avec la suspension
bactérienne à identifier. Les réactions produites pendant la période d’incubation se traduisent par des
virages colorés spontanés ou révélés par l’addition de réactifs (Biomérieux).
b- Technique
Préparation de la galerie
Réunir fond et couvercle d’une boîte d’incubation et répartir de l’eau dans les alvéoles pour créer une
atmosphère humide.
Déposer stérilement la galerie dans la boîte d’incubation
Préparation de l’inoculum
Ouvrir un tube d’eau distillée stérile
Prélever une seule colonie bien isolée sur milieu gélosé