ІІ. Matériel et méthodes
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La confirmation des colonies suspectées a été effectuées par un certains nombres de tests
biochimiques (coloration de Gram, test de catalase, test de l’oxydase et galerie API 20 E),
(Figure 14)
Figure 17 : Technique de recherche de vibrion dans le sédiment.
ІІ.5.Technique de caractérisation et d’identification de quelques bactéries :
ІІ.5.1.Coloration de Gram (Aspect microscopique)
Un frottis fixé à la chaleur et coloré pendant une minute avec une solution de violet de gentiane,
Le frottis coloré est fixé avec une solution iodo-ioduré de Lugol, et il y est maintenu pendant une
minute. Le frottis est ensuite décoloré avec l’alcool à 95% pendant quelques secondes jusqu’à
élimination de l’excès du colorant puis rincé immédiatement avec l’eau du robinet. Le frottis est
ensuite traité avec un colorant qui est une solution de fushine, rincé rapidement au robinet et séché.
Après ce traitement, les cellules à Gram négatif apparaissent roses et les cellules à Gram positif
apparaissent sous une couleur violette (Singleton et Saintsbury, 1984).
1 g de sédiment + 9 ml
EPA simple
concentré
18h -24h à 37°C
Isolement
(Ensemencement)
Colonie jaune ou verte.
18h -24h à 37°C
TCBS