Chapitre III
Matériel et Méthode
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3.2.1.4.Demande biochimique en Oxygène (DBO 5 )
Elle est représentée par la quantité d’oxygène nécessaire aux microorganismes pour dégrader
la matière organique dans l’eau (Aminot & Chaussepied., 1983).
C’est une méthode manométrique avec des manomètres de marque OxiTop à affichage
numérique qui se fixe directement sur le flacon de DBO. Il permet de mesurer la quantité
d’oxygène consommée et qui est induite par la production de CO2 absorbé par un piège à
soude créant ainsi une dépression enregistrée par le manomètre. Cette dépression est liée par
corrélation à la DBO en fonction du volume de l’échantillon (annexe II).
Le mode opératoire est décrit dans le catalogue de l’appareil :
 La prise d’essai est de 250 ml.
 Introduire 250ml dans un flacon brun en verre contenant un baromagnétique.
 Mettre deux pastilles de soude (NaOH) dans un ruban en caoutchouc dans le
goulot de la bouteille.
 Fermer les flacons par les têtes et mettre à 0.
 La température est équilibrée par un thermostat réglé à 20°C.
 Les échantillons sont incubés à l’obscurité dans une armoire thermorégulatrice
fermée à clef pendant cinq jours.
 La lecture des résultats se fait selon la formule suivante :
DBO 5 (mg d’O 2 /L) = Valeur lu * Facteur ……………………………………….… (3.4)
- Valeur lu : afficher sur la tête de chaque flacon.
- Facteur : un coefficient en relation avec le volume incubé (annexe II).
3.2.1.5.Dosage des sels nutritifs
3.2.1.5.1. Méthode d’analyse
Les sels nutritifs (NO 3
-
, NO 2
-
, NH 4
+ , PO 4
3- et SiO 2 ) ont été mesurés par la méthode de dosage
par colorimétrie à flux continu et automatisé sur l’appareil « Auto Analyser San Plus »
S.F.A.S troisième génération selon les protocoles définis par SKALAR 1998.
3.2.1.5.2. Définition de la colorimétrie
Cette méthode est l’une des méthodes de dosage chimique des sels nutritifs basée sur
l’absorption de la lumière par la solution analysée. Elle est appelée aussi photométrie ou
absorptiomètre. La colorimétrie est basée sur la loi de Beer-Lambert qui est définit comme
suit :
Loi de Beer-Lambert
L’absorption et la transmission sont deux phénomènes auxquels est soumise une substance
d’épaisseur (L) traversée par un faisceau lumineux monochromatique. Les quantités de
lumières absorbées (Absorbance) et transmise (Transmission) obéissent à la loi de BeerLambert ;
A = D.O = log (I 0 /I) = ε.I.C …………………………………………………………. (3.5)