Chapitre III
Matériel et Méthode
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Mode opératoire
 Numéroter et peser les creusets vides (P 0 ),
 Peser les creusets munis des filtres (P 1 ),
 Mettre les creusets dans le four à moufle à 450°C pendant 2 heures,
 Laisser refroidir au dessiccateur, peser une seconde fois (P 2 ),
 Calculer le taux de matière organique particulaire par la formule suivante :
MOP (mg/l) = [(P 1 -P 2 )/V] ………………………………………………. (3.2)
- MOP : matière organique particulaire (%).
- P 1 : Poids du filtre avant séchage (mg).
- P 2 : Poids du filtre après séchage (mg).
3.2.1.3.Dosage de la chlorophylle a par fluorométrie
La concentration en chlorophylle a été déterminée selon la méthode fluorimétrique de
Yenstch et Menzel (1963) adaptée par Holm-Hansen et Rieman (1978) pour l'extraction des
pigments à l'aide du méthanol. Elle a été élaborée pour une application en milieu marin, a
l’avantage d’être très sensible et ne nécessite qu’un faible volume d’échantillon. (Raimbault
& Boudjellal., 1997)
Principe de la méthode de dosage
Le phytoplancton est recueilli sur un filtre en fibre de verre (GF/F, de porosité environ
0,45μm et de diamètre 25mm) et repris dans une solution de méthanol. Les pigments
chlorophylliens sont excités par un faisceau lumineux à 450 nm. La fluorescence émise est
mesurée à 670 nm.
Mode opératoire (annexe II)
Calcul des concentrations
La technique d'acidification permettant de déterminer la part des phaeopigments a été utilisée.
Mais en présence de chlorophylle b dans l'échantillon cette technique entraîne une sousestimation des teneurs en chlorophylle a. Les résultats fournis ne concernent donc que la
chlorophylle a calculée d'après la formule suivante qui néglige la présence des
phaeopigments:
Chl (µg/l) = (F 0 /K 0 )*(v/V) ……………………………………………………………. (3.3)
- F 0 : valeur de fluorescence
- K 0 : est le coefficient d'étalonnage établie avec de la chlorophylle a pure (Sigma
C5753)
- V : le volume filtré (250 ml) et v : est le volume d'extraction (7ml).