Chapitre 3 : Matériels et méthodes
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b) Les réactifs exigés
- Réactif 1 : solution de sulfanilamide.
- Réactif 2 : solution de N-Naphtyl-éthylènediamine.
- Solution étalon primaire de nitrite.
- Solution étalon secondaire de nitrite.
La préparation des réactifs est décrite en annexe 3.
c) Etalonnage
- Introduire, dans des fioles jaugées de 100 ml, 0,4 ml -0,8 ml -1,2 ml -1,6 ml -2 ml -
2,4 ml de l’étalon secondaire et compléter à 100ml avec l’eau distillée, afin d’obtenir la gamme
de concentrations : 0,2 μmole/l -0,4 μmole/l -0,6 μmole/l -0,8 μmole/l -1 μmole/l -1,2μmole/l.
- Faire l’analyse de ces étalons selon le processus décrit pour les nitrites.
- Mesurer l’absorbance et tracer la courbe d’étalonnage.
La courbe d'étalonnage établit (Figure 3.10) a pour équation y = 0,5664x avec R² = 0,9999.
Figure 3.10 : Courbe d’étalonnage de nitrite.
d) Mode opératoire
- Rincer une éprouvette de 50 ml avec l’eau à analyser et y introduire 50 ml de l’échantillon.
- Ajouter 1 ml de réactif 1 et mélanger.
- Laisser reposer 2 à 8 minutes.
- Ajouter 1 ml du réactif 2 et mélanger à nouveau.
- Attendre 10 min mais pas dépasser 2 heures.
- Mesurer l’absorbance a la longueur d’onde de 543 nm, en prenant de l’eau distillée comme
référence. Soit Atr cette valeur.
y = 0,5664x
R² = 0,9999
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0
0,5
1
1,5
ABS
μmole/l