Troisième chapitre
Matériel et méthodes
21
- Dosage des nitrites totaux
A 100 ml d échantillons nous ajoutons 2 ml de chlorure d’ammonium concentré, puis nous
passons l échantillon par une colonne de cadmium (annexe 6) afin de réduire les nitrates en
nitrites, nous récupérons ces derniers pour terminer le dosage.
Après ces deux analyses, l’échantillon des nitrites totaux et l’échantillon des nitrites seuls sont
dosés par les mêmes solutions que le dosage des nitrites (annexe 3).
c) Expression des résultats
L’absorbance est lue à 543 nm, par rapport à l’eau distillée, en cuves de 1 cm de trajet
optique. La teneur en azote nitrique de l’échantillon est obtenue par la différence entre l’azote
nitreux total ainsi déterminé et l’azote nitreux seuls.
2.2.4 - Orthophosphates
a) Principe
En milieu acide et en présence de molybdate d’ammonium, les orthophosphates donnent un
complexe phosphomolybdique qui, réduit par l’acide ascorbique, développe une coloration
bleue susceptible d’un dosage spectrophotométrique. Certaines formes organiques pouvant
être hydrolysées au cours de l’établissement de la coloration est accélérée par l’utilisation
d’un catalyseur, le tartrate double d’antimoine et de potassium.
b) Mode opératoire
La température des échantillons doit être comprise entre 15 et 30°C. Nous introduisons dans
des fioles jaugées, 100 ml d’échantillons, après nous ajoutons 10 ml d’un mélange de réactifs
(R 1 ) dans chaque fiole et homogénéisons aussitôt sans oublier l’agitation, ce dernier est
composé de molybdate d’ammonium d’acide sulfurique, d’acide ascorbique ,
c) Expression des résultats
d’oxytatrate de
potassium et d’antimoine, la lecture est réalisée après 5minutes (annexe 4).
L’absorbance est lue à 885 nm, par rapport à l’eau distillée, en cuves de 1 cm du trajet
optique. La courbe donne la teneur en phosphore, exprimée en milligrammes pour la prise
d’essai.
2.2.5 - Les silicates
Cette technique est réalisée selon la méthode de (MULLIN et RILEY,1955 in AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983). Elle est basée sur la réaction de l’acide ortho silicique avec la
molybdate d’ammonium pour former un complexe molybdosilicique, ce dernier sera réduit
par l’acide ascorbique qui donnera une coloration bleue. L’absorption se fait à une longueur
d’onde de 810 nm. Les silicates ont été dosés par la méthode d’analyse chimique automatisée
à l’aide d’un auto-analyseur de type Skalar (Skalar San
+
) (fig. n°15) (annexe 5).
(ATTOUCHI, 2008).
Matériel et méthodes
21
- Dosage des nitrites totaux
A 100 ml d échantillons nous ajoutons 2 ml de chlorure d’ammonium concentré, puis nous
passons l échantillon par une colonne de cadmium (annexe 6) afin de réduire les nitrates en
nitrites, nous récupérons ces derniers pour terminer le dosage.
Après ces deux analyses, l’échantillon des nitrites totaux et l’échantillon des nitrites seuls sont
dosés par les mêmes solutions que le dosage des nitrites (annexe 3).
c) Expression des résultats
L’absorbance est lue à 543 nm, par rapport à l’eau distillée, en cuves de 1 cm de trajet
optique. La teneur en azote nitrique de l’échantillon est obtenue par la différence entre l’azote
nitreux total ainsi déterminé et l’azote nitreux seuls.
2.2.4 - Orthophosphates
a) Principe
En milieu acide et en présence de molybdate d’ammonium, les orthophosphates donnent un
complexe phosphomolybdique qui, réduit par l’acide ascorbique, développe une coloration
bleue susceptible d’un dosage spectrophotométrique. Certaines formes organiques pouvant
être hydrolysées au cours de l’établissement de la coloration est accélérée par l’utilisation
d’un catalyseur, le tartrate double d’antimoine et de potassium.
b) Mode opératoire
La température des échantillons doit être comprise entre 15 et 30°C. Nous introduisons dans
des fioles jaugées, 100 ml d’échantillons, après nous ajoutons 10 ml d’un mélange de réactifs
(R 1 ) dans chaque fiole et homogénéisons aussitôt sans oublier l’agitation, ce dernier est
composé de molybdate d’ammonium d’acide sulfurique, d’acide ascorbique ,
c) Expression des résultats
d’oxytatrate de
potassium et d’antimoine, la lecture est réalisée après 5minutes (annexe 4).
L’absorbance est lue à 885 nm, par rapport à l’eau distillée, en cuves de 1 cm du trajet
optique. La courbe donne la teneur en phosphore, exprimée en milligrammes pour la prise
d’essai.
2.2.5 - Les silicates
Cette technique est réalisée selon la méthode de (MULLIN et RILEY,1955 in AMINOT et
CHAUSSEPIED, 1983). Elle est basée sur la réaction de l’acide ortho silicique avec la
molybdate d’ammonium pour former un complexe molybdosilicique, ce dernier sera réduit
par l’acide ascorbique qui donnera une coloration bleue. L’absorption se fait à une longueur
d’onde de 810 nm. Les silicates ont été dosés par la méthode d’analyse chimique automatisée
à l’aide d’un auto-analyseur de type Skalar (Skalar San
+
) (fig. n°15) (annexe 5).
(ATTOUCHI, 2008).