Chapitre I
Matériels et méthodes
2008-2009
- 12 -
Calcul et expression des résultats
[chlorophylle-a] (µg/l) = 27,7(A 665
na
-A 665
a
)*v/V.I.
[Phéopigments] (µg/l) = 27,7[(1,7A 665
a
)-A 665
na
)*v/V.I.
Avec:
V: Volume d’eau filtrée (l).
v : Volume d’acétone (ml).
I : Longueur du chemin optique de la cuve de mesure (1cm).
Et :
A 665
na = (A brut 665
na - bc 665 )-(A brut
na - bc 750 )
A 665
a = (A brut 665
a - bc 665 )- (A brut
a
- bc 750 )
Avec :
A 665
na : Absorbance corrigée à 665nm avant acidification.
A 665
a : Absorbance corrigée à 665nm après acidification.
Ab 665
na : Absorbance de l’échantillon à 665nm avant acidification.
Ab 665
a : Absorbance de l’échantillon à 665nm après acidification.
Ab 750
na : Absorbance de l’échantillon à 750nm avant acidification.
Ab 750
a : Absorbance de l’échantillon à 750nm après acidification.
bc 665 : Absorbance de blanc de cuve à 665nm.
bc 750 : Absorbance de blanc de cuve à 750nm.
I.3.4. Les Sels nutritifs
Ce sont des éléments chimiques indispensables à la synthèse autotrophe de la matière
organique. Le terme est souvent réservé aux éléments dont la concentration constitue parfois
un facteur limitant, ces éléments sont : Azote, Phosphore, Silicium, (LACAZE, 1996).
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates,
Orthophosphates et silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels
réagissent dans certaines conditions (température, pH, présence de catalyseurs,…) avec des
réactifs spécifiques pour donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur
d’onde (λ), (AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même,
cette dernière est d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité
optique (D.O), obéit à la loi de BEER-LAMBERT qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O = log(I 0 /I) = ε.L.C
Matériels et méthodes
2008-2009
- 12 -
Calcul et expression des résultats
[chlorophylle-a] (µg/l) = 27,7(A 665
na
-A 665
a
)*v/V.I.
[Phéopigments] (µg/l) = 27,7[(1,7A 665
a
)-A 665
na
)*v/V.I.
Avec:
V: Volume d’eau filtrée (l).
v : Volume d’acétone (ml).
I : Longueur du chemin optique de la cuve de mesure (1cm).
Et :
A 665
na = (A brut 665
na - bc 665 )-(A brut
na - bc 750 )
A 665
a = (A brut 665
a - bc 665 )- (A brut
a
- bc 750 )
Avec :
A 665
na : Absorbance corrigée à 665nm avant acidification.
A 665
a : Absorbance corrigée à 665nm après acidification.
Ab 665
na : Absorbance de l’échantillon à 665nm avant acidification.
Ab 665
a : Absorbance de l’échantillon à 665nm après acidification.
Ab 750
na : Absorbance de l’échantillon à 750nm avant acidification.
Ab 750
a : Absorbance de l’échantillon à 750nm après acidification.
bc 665 : Absorbance de blanc de cuve à 665nm.
bc 750 : Absorbance de blanc de cuve à 750nm.
I.3.4. Les Sels nutritifs
Ce sont des éléments chimiques indispensables à la synthèse autotrophe de la matière
organique. Le terme est souvent réservé aux éléments dont la concentration constitue parfois
un facteur limitant, ces éléments sont : Azote, Phosphore, Silicium, (LACAZE, 1996).
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates,
Orthophosphates et silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels
réagissent dans certaines conditions (température, pH, présence de catalyseurs,…) avec des
réactifs spécifiques pour donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur
d’onde (λ), (AMINOT et CHAUSSEPIED, 1983).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même,
cette dernière est d’autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité
optique (D.O), obéit à la loi de BEER-LAMBERT qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O = log(I 0 /I) = ε.L.C
