Chapitre I
Matériels et méthodes
2008-2009
- 11 -
P 4 : Poids du creuset et du filtre après passage au four.
L’expression : MES-MOP, nous donnera alors la MIP.
I.3.3. La chlorophylle et phéopigment
La chlorophylle-a est le principal pigment photosynthétique des plantes. En
convertissant l’énergie lumineuse en énergie chimique, elle permet la photosynthèse. La
chlorophylle-a reste un bon indicateur de la biomasse phytoplanctonique. Donc c’est un
paramètre clé des études en hydrologie marine car il existe de nombreux liens entre le
développement du phytoplancton et les variations de la concentration de plusieurs
paramètres (O 2 ; nutriment, pH ; carbone organique particulaire). Dans les milieux strictement
marins, les phéopigments résultent du broutage et de dégradation des cellules et par
conséquent ne sont pas physiologiquent actifs. La mesure des phéopigments est utilisée
comme critère de l’état physiologique des populations phytoplanctoniques, (AMINOT et
KEROUEL, 2004).
La phéophytine a c’est le résultat de la dégradation de la chlorophylle-a
Protocole de dosage de la chlorophylle-a et des phéopigments a
Après filtration d’un certain volume d’eau de mer pour concentrer le matériel
particulaire, le filtre est immergé dans un solvant qui assure l’extraction des pigments,
puis on mesure l’absorbance de l’extrait à une ou plusieurs longueurs d’onde, par la
méthodes spectrophotométrique monochromatique, avant et après acidification si l’on
recherche également les formes dégradées.
Appareillage
Une pompe sous vide et un système de filtration.
Une centrifugeuse.
Un spectrophotomètre de marque CECIL type CE 1021 séries 10000.
Des filtres Whatman 0,45µm.
Des tubes en verre.
Mode opératoire
filtrer 500ml d’eau de mer.
Après filtration, mettre les filtres dans des tubes à centrifuger et ajouter 10ml
d’acétone 90%.
Déchiqueter les filtres.
Envelopper les tubes avec papier d’aluminium pour garder les filtres à l’abri
de la lumière.
Mettre les tubes dans le réfrigérateur pendant 24h à 5°C.
Mettre les tubes dans la centrifugeuse.
Mesurer les absorbances brutes des extraits non acidifiés selon la méthode de
LORENZEN à deux longueurs d’onde : 665 et 750nm.
Acidifier par addition d’acide chlorhydrique 2 mol/l.
Mesurer les absorbances brutes des extraits acidifiés à 665 et 750nm.
Matériels et méthodes
2008-2009
- 11 -
P 4 : Poids du creuset et du filtre après passage au four.
L’expression : MES-MOP, nous donnera alors la MIP.
I.3.3. La chlorophylle et phéopigment
La chlorophylle-a est le principal pigment photosynthétique des plantes. En
convertissant l’énergie lumineuse en énergie chimique, elle permet la photosynthèse. La
chlorophylle-a reste un bon indicateur de la biomasse phytoplanctonique. Donc c’est un
paramètre clé des études en hydrologie marine car il existe de nombreux liens entre le
développement du phytoplancton et les variations de la concentration de plusieurs
paramètres (O 2 ; nutriment, pH ; carbone organique particulaire). Dans les milieux strictement
marins, les phéopigments résultent du broutage et de dégradation des cellules et par
conséquent ne sont pas physiologiquent actifs. La mesure des phéopigments est utilisée
comme critère de l’état physiologique des populations phytoplanctoniques, (AMINOT et
KEROUEL, 2004).
La phéophytine a c’est le résultat de la dégradation de la chlorophylle-a
Protocole de dosage de la chlorophylle-a et des phéopigments a
Après filtration d’un certain volume d’eau de mer pour concentrer le matériel
particulaire, le filtre est immergé dans un solvant qui assure l’extraction des pigments,
puis on mesure l’absorbance de l’extrait à une ou plusieurs longueurs d’onde, par la
méthodes spectrophotométrique monochromatique, avant et après acidification si l’on
recherche également les formes dégradées.
Appareillage
Une pompe sous vide et un système de filtration.
Une centrifugeuse.
Un spectrophotomètre de marque CECIL type CE 1021 séries 10000.
Des filtres Whatman 0,45µm.
Des tubes en verre.
Mode opératoire
filtrer 500ml d’eau de mer.
Après filtration, mettre les filtres dans des tubes à centrifuger et ajouter 10ml
d’acétone 90%.
Déchiqueter les filtres.
Envelopper les tubes avec papier d’aluminium pour garder les filtres à l’abri
de la lumière.
Mettre les tubes dans le réfrigérateur pendant 24h à 5°C.
Mettre les tubes dans la centrifugeuse.
Mesurer les absorbances brutes des extraits non acidifiés selon la méthode de
LORENZEN à deux longueurs d’onde : 665 et 750nm.
Acidifier par addition d’acide chlorhydrique 2 mol/l.
Mesurer les absorbances brutes des extraits acidifiés à 665 et 750nm.