Chapitre II
Matériel et méthodes
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- L : est le trajet optique (épaisseur du milieu absorbant) ;
- C : est la concentration du milieu absorbant.
 Matériel utilisé
- Auto-Analyzer SAN plus System de marque SKALAR
®
, 1998;
- Bi-distillateur MILLI-Q
® Reagent Water System, balance, spatules, béchers et étuve ;
- Deux micropipettes Fortuna
® avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL , une de 200 à
1000 μ l et l’autre de 20 à 250 μ l. Des fioles de 100 et 500 ml ;
II.3.2.1. 2.Principe de dosage de l’Azote ammoniacal (NH4
+
)
Le constructeur SKALAR a adapté la procédure automatisée par Thé pour la détermination de
l’ammonium contenue dans l’eau de mer. Elle est basée sur la réaction de Berthelot (1859) modifiée
par Thé. Elle s'applique à des concentrations allant de 2 à 100 ppb N. En milieu alcalin
(8 < pH < 11,5), l'ammonium dissous réagit sur l’hypochlorite pour former une monochloramine.
Ce composé, en présence de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant) donne lieu à la
formation d’un bleu indophénol. Après oxydation, un composé coloré vert est formé. La réaction de
Thé est catalysée par le nitroprussiate de sodium. Le composé formé dans un maximum
d’absorption qui se fait à une longueur d’onde de 630 nm (SKALAR® 1998).
II.3.2.1. 3.principe de dosage de l’azote nitreux (NO2
- )
La méthode décrite, fondée sur la réaction de Griess, a été appliquée à l’eau de mer par
Bendschneider et Robinson (1952). Les ions nitrite forment un diazoïque avec la sulfanilamide en
milieu acide (pH < 2), puis le diazoïque réagit avec le N-naphtyl-éthylènediamine pour former le
colorant rose absorbe à la longueur d’onde de 543 nm.
II.3.2.1. 4. Principe de dosage de l’azote nitrique (NO 3
- )
La méthode retenue est celle fondée sur le dosage des ions NO2
- obtenus par réduction quantitative
des ions NO3
-
. En réalité on mesure la somme des concentrations des ions NO3
- et NO2
- . Par
déduction de la concentration en nitrite, déterminé sans réduction, on obtient la concentration en
nitrate. La réduction est effectuée par passage de l’échantillon sur une colonne de cadmium traité au
cuivre (Wood et al., 1967).
II.3.2.1. 5. Principe de dosage du phosphore (PO4
-3
)
Les ions phosphate réagissent avec le molybdate d’ammonium, en présence d’antimoine (III), pour
former un complexe que l’on réduit par l’acide ascorbique ; cette forme réduite, de coloration bleue,
a un maximum d’absorption à 885 nm.
II.3.2.1. 6. Principe de dosage des silicates (SiO2
-
)
Le dosage de l'acide orthosilicique dans l'eau de mer est basé sur la méthode de Murphy et
Riley (l962). C’est une méthode automatique selon le constructeur SKALAR. Elle repose sur la
formation de l'acide silicomolybdique, non affectée par la salinité proposée par Smith et Milne
(1981) (in Aminot et Kérouel, 2004). Sa mesure est basée sur la formation d’un complexe
silicomolybdique par la réaction des silicates avec le molybdates d'ammonium en milieu acide. Ce
complexe sera par la suite réduit par l'acide ascorbique en donnant naissance à un compose colore
en bleu absorbant à 810 nm. L'acide oxalique et ajouté pour éviter les interférences des phosphates.
II.3.2.2. Le dosage des métaux traces dans les sédiments superficiels
Le dosage d’éléments métalliques en trace dans le milieu marin nécessite un contrôle
rugueux et permanent des différentes étapes, car il existe des risques de contamination des
échantillons du moment de prélèvement qu’à celui de l’analyse finale. Pour cela, un soin particulier
a été apporté aux prélèvements et aux méthodes de dosage des métaux (AIEA, 2001).