Chapitre 2
Matériels & Méthodes
39
Un système de pompe crée un flux continu entre les différents éléments de la chaîne,
flux qui entraîne automatiquement l’échantillon au travers du système (voir le circuit
analytique pour le dosage de chaque paramètre en annexe 5 et 6) pour son analyse.
Le dosage de chaque paramètre est passé en revue ci-après :
2.5.2.3.1. Dosage de l’ammonium
Le dosage de l’ammonium (ܰܪ ସ
ା ) est réalisé suivant la méthode de Koroleff (1969
in Aminot et Chaussepied, 1983). En milieu alcalin (8 < pH < 11,5), l’ammonium dissout
réagit sur l’hypochlorite pour former une monochloramine. Ce composé, en présence
de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant) donne lieu à la formation d’un bleu
d’indophénol. La réaction est catalysée par le nitroprussiate de sodium. Le maximum
d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm (Lourguioui, 2007).
2.5.2.3.2. Dosage des nitrites
Le dosage des nitrites (ܱܰ ଶ
ି ) est réalisé selon la méthode de GRIESS qui repose sur
la formation d'un complexe coloré par réaction de diazotation entre l'ion nitrite, une amine
primaire aromatique, la Sulfanilamide et une autre amine aromatique, le Dihydrochlorure
de N-(1-naphthyl)-éthylène diamine (NED). En effet, Il s'agit de la réaction de GRIESS,
réaction de diazotation spécifique de l'acide nitreux, qui se produit en deux étapes :
L’ion nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un composé
diazoïque (sel de diazonium) qui se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED
pour former un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (Benschneider et Robinson, 1952
et SKALAR, 1998 in lourguioui, 2007) est proportionnelle à la concentration des ions nitrite.
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylène diamine (NED)
Figure 2.24 : Réactifs de GRIESS pour le dosage des nitrites
2.5.2.3.3. Dosage des nitrates :
Selon Wood et al. (1967 in Lourguioui, 2007), Le passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre permet la réduction des nitrates (ܱܰ ଷ
ି ) en nitrites
(ܱܰ ଶ
ି ). Ces dernières (ܱܰ ଶ
ି initiaux + ܱܰ ଷ
ି réduits) seront ensuite dosées par colorimétrie
selon la méthode précédemment décrite. D’après Rodier et al. (1996), les concentrations
de nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice.
Matériels & Méthodes
39
Un système de pompe crée un flux continu entre les différents éléments de la chaîne,
flux qui entraîne automatiquement l’échantillon au travers du système (voir le circuit
analytique pour le dosage de chaque paramètre en annexe 5 et 6) pour son analyse.
Le dosage de chaque paramètre est passé en revue ci-après :
2.5.2.3.1. Dosage de l’ammonium
Le dosage de l’ammonium (ܰܪ ସ
ା ) est réalisé suivant la méthode de Koroleff (1969
in Aminot et Chaussepied, 1983). En milieu alcalin (8 < pH < 11,5), l’ammonium dissout
réagit sur l’hypochlorite pour former une monochloramine. Ce composé, en présence
de phénol et d’un excès d’hypochlorite (milieu oxydant) donne lieu à la formation d’un bleu
d’indophénol. La réaction est catalysée par le nitroprussiate de sodium. Le maximum
d’absorption se fait à une longueur d’onde de 630 nm (Lourguioui, 2007).
2.5.2.3.2. Dosage des nitrites
Le dosage des nitrites (ܱܰ ଶ
ି ) est réalisé selon la méthode de GRIESS qui repose sur
la formation d'un complexe coloré par réaction de diazotation entre l'ion nitrite, une amine
primaire aromatique, la Sulfanilamide et une autre amine aromatique, le Dihydrochlorure
de N-(1-naphthyl)-éthylène diamine (NED). En effet, Il s'agit de la réaction de GRIESS,
réaction de diazotation spécifique de l'acide nitreux, qui se produit en deux étapes :
L’ion nitrite réagit avec le sulfanilamide (4-H2NC6H4SO2NH2) pour former un composé
diazoïque (sel de diazonium) qui se combine ensuite en milieu acide (pH<2) avec le NED
pour former un composé rosé dont l’absorbance à 540nm (Benschneider et Robinson, 1952
et SKALAR, 1998 in lourguioui, 2007) est proportionnelle à la concentration des ions nitrite.
Sulfanilamide
Phényldiazonium
Dihydrochlorure de N-(1-naphthyl)Éthylène diamine (NED)
Figure 2.24 : Réactifs de GRIESS pour le dosage des nitrites
2.5.2.3.3. Dosage des nitrates :
Selon Wood et al. (1967 in Lourguioui, 2007), Le passage des échantillons dans
une colonne de cadmium traité au cuivre permet la réduction des nitrates (ܱܰ ଷ
ି ) en nitrites
(ܱܰ ଶ
ି ). Ces dernières (ܱܰ ଶ
ି initiaux + ܱܰ ଷ
ି réduits) seront ensuite dosées par colorimétrie
selon la méthode précédemment décrite. D’après Rodier et al. (1996), les concentrations
de nitrates sont obtenues après la soustraction des concentrations de nitrites déterminés,
antérieurement, avant le passage des échantillons dans la colonne réductrice.