Chapitre 2
Matériels & Méthodes
40
2.5.2.3.4. Dosage des orthophosphates
Le principe du dosage des orthophosphates selon la méthode de Murphy et Riley (1962)
repose sur la réaction de l'anion orthophosphate (ܱܲ ସ
ଷି ) avec l’ion molybdate d'ammoniumet
l’ion oxydrate de potassium (Antimoine) en milieu acide pour la formation de l'acide
phosphomolybdique. Cet acide est réduit par l'acide ascorbique en bleu
de molybdène dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion
orthophosphate présent dans un échantillon.
2.5.2.3.5. Dosage du silicium dissout :
Présent à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH) (Aminot et Chaussepied, 1983
in Lourguioui, 2007), le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium
en milieu acide pour former un complexe silicomolybdique qui réduit par l’acide ascorbique
donne un composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin et Riley, 1955 in
Lourguioui, 2007). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.
2.5.2.3.6. Étalonnage, mesure et calcul :
L’étalonnage nécessite, pour chaque sel à doser, la préparation d’une solution mère
et d’une solution fille (voir annexes 7 à 10). Une fois la solution fille prête, nous employons
le principe de neutralisation pour préparer d’autres solutions filles plus diluées (standards),
qui constitueront une gamme-étalons (voir annexe 11).
Le signal d’absorption mesuré en continu par le spectrophotomètre est traduit sous
la forme d’un pic sur un ordinateur interfacé. La hauteur du pic est proportionnelle
à la concentration du sel dans l’échantillon. La mesure de standards de concentrations
connues permet de calculer une droite de régression (de la forme Y = aX + b) qui est utilisée
pour déterminer les concentrations inconnues. Les pics sont mesurés par rapport à une ligne
de base constituée d’eau de mer oligotrophe (épuisée de nutriments).
Le logiciel intégré de l’appareil utilisé réalise automatiquement tous les calculs
nécessaires pour nous permettre d’obtenir les droites d’étalonnage ci-après.
Matériels & Méthodes
40
2.5.2.3.4. Dosage des orthophosphates
Le principe du dosage des orthophosphates selon la méthode de Murphy et Riley (1962)
repose sur la réaction de l'anion orthophosphate (ܱܲ ସ
ଷି ) avec l’ion molybdate d'ammoniumet
l’ion oxydrate de potassium (Antimoine) en milieu acide pour la formation de l'acide
phosphomolybdique. Cet acide est réduit par l'acide ascorbique en bleu
de molybdène dont l'absorbance à 880nm est proportionnelle à la concentration de l’ion
orthophosphate présent dans un échantillon.
2.5.2.3.5. Dosage du silicium dissout :
Présent à 95 % sous forme d’acide orthosilicique Si(OH) (Aminot et Chaussepied, 1983
in Lourguioui, 2007), le silicium dissous réagit avec le molybdate d’ammonium
en milieu acide pour former un complexe silicomolybdique qui réduit par l’acide ascorbique
donne un composé coloré en bleu absorbant à 810 nm (Mullin et Riley, 1955 in
Lourguioui, 2007). L’ajout de l’acide oxalique évite l’interférence des phosphates.
2.5.2.3.6. Étalonnage, mesure et calcul :
L’étalonnage nécessite, pour chaque sel à doser, la préparation d’une solution mère
et d’une solution fille (voir annexes 7 à 10). Une fois la solution fille prête, nous employons
le principe de neutralisation pour préparer d’autres solutions filles plus diluées (standards),
qui constitueront une gamme-étalons (voir annexe 11).
Le signal d’absorption mesuré en continu par le spectrophotomètre est traduit sous
la forme d’un pic sur un ordinateur interfacé. La hauteur du pic est proportionnelle
à la concentration du sel dans l’échantillon. La mesure de standards de concentrations
connues permet de calculer une droite de régression (de la forme Y = aX + b) qui est utilisée
pour déterminer les concentrations inconnues. Les pics sont mesurés par rapport à une ligne
de base constituée d’eau de mer oligotrophe (épuisée de nutriments).
Le logiciel intégré de l’appareil utilisé réalise automatiquement tous les calculs
nécessaires pour nous permettre d’obtenir les droites d’étalonnage ci-après.