Troisième partie
Résultats et discussion
f
53
II.1-Identification des lipides par CCM :
La chromatographie sur couches minces a été mise en œuvre pour détecter les lipides
présents dans les échantillons extraits par l’éther éthylique et par le chloroforme.
En absence des étalons internes à part l’acide linoléique, il nous a été difficile de déterminer
les composants lipidiques correspondants aux RF (Rating Factor) mesurés. De ce fait, nous
avons essayé d’identifier certains RF à la littérature (Randerrat. K, 1971) (annexe I.5,6)
Séparation sur couches normales (non imprégnées):
Deux systèmes éluant ont été utilisés pour cette partie à titre expérimental et l'identification des
RF a été faite selon la littérature (Randerrat. K, 1971), la phase stationnaire étant le gel de silice
(phase stationnaire polaire).
Le premier système éluant utilisé est le chloroforme/acide acétique (96 : 4):
Dans le premier essai, on a déposé sur la couche mince les échantillons de poissons extraits
par l’éther éthylique, après un temps de développement de 41 min pour une distance de
12cm, on a identifié les composés suivants : le cholestérol et les acides gras C 16- C 24 (tableau
N° III.12 et figure N° III.3).
Dans le deuxième essai on a déposé sur la couche mince les échantillons de poissons extraits
par le chloroforme, après un temps de développement de 45 min pour une distance de 13cm,
on a identifié chez toutes les espèces étudiées les composés suivants: le mono-stéarate de
glycéryle, le cholestérol et le di stéarine.
Le deuxième système éluant utilisé est: l’éther de pétrole / éther éthylique / acide acétique
glacial (80:20:1). Ce 3
ème
essai est appliqué sur les lipides extraits avec l’éther éthylique.
Après un parcours de l’éluant de 12,7 cm et un temps de développement de 60min, on a
obtenu sept taches, leur identification a été difficile en absence de la littérature mais, on
identifier deux taches, dont leur RF, était sensiblement égale aux valeurs données dans la
littérature (annexe I.5, 6). Ces composants sont le cis héxadécène-11 oique et l’acide oléique
(cis).
Séparation sur couches imprégnées:
Les couches minces ont été imprégnées pour rendre la phase stationnaire (gel de silice)
moins polaire (phase inversée) et mettre en évidence les acides gras saturés et insaturés
présents dans la chair lyophilisée.
Les plaques utilisées sont imprégnées soit par la paraffine à 5% dans l’éther de pétrole, soit au
dodécane à 15% dans l’éther de pétrole.
Résultats et discussion
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II.1-Identification des lipides par CCM :
La chromatographie sur couches minces a été mise en œuvre pour détecter les lipides
présents dans les échantillons extraits par l’éther éthylique et par le chloroforme.
En absence des étalons internes à part l’acide linoléique, il nous a été difficile de déterminer
les composants lipidiques correspondants aux RF (Rating Factor) mesurés. De ce fait, nous
avons essayé d’identifier certains RF à la littérature (Randerrat. K, 1971) (annexe I.5,6)
Séparation sur couches normales (non imprégnées):
Deux systèmes éluant ont été utilisés pour cette partie à titre expérimental et l'identification des
RF a été faite selon la littérature (Randerrat. K, 1971), la phase stationnaire étant le gel de silice
(phase stationnaire polaire).
Le premier système éluant utilisé est le chloroforme/acide acétique (96 : 4):
Dans le premier essai, on a déposé sur la couche mince les échantillons de poissons extraits
par l’éther éthylique, après un temps de développement de 41 min pour une distance de
12cm, on a identifié les composés suivants : le cholestérol et les acides gras C 16- C 24 (tableau
N° III.12 et figure N° III.3).
Dans le deuxième essai on a déposé sur la couche mince les échantillons de poissons extraits
par le chloroforme, après un temps de développement de 45 min pour une distance de 13cm,
on a identifié chez toutes les espèces étudiées les composés suivants: le mono-stéarate de
glycéryle, le cholestérol et le di stéarine.
Le deuxième système éluant utilisé est: l’éther de pétrole / éther éthylique / acide acétique
glacial (80:20:1). Ce 3
ème
essai est appliqué sur les lipides extraits avec l’éther éthylique.
Après un parcours de l’éluant de 12,7 cm et un temps de développement de 60min, on a
obtenu sept taches, leur identification a été difficile en absence de la littérature mais, on
identifier deux taches, dont leur RF, était sensiblement égale aux valeurs données dans la
littérature (annexe I.5, 6). Ces composants sont le cis héxadécène-11 oique et l’acide oléique
(cis).
Séparation sur couches imprégnées:
Les couches minces ont été imprégnées pour rendre la phase stationnaire (gel de silice)
moins polaire (phase inversée) et mettre en évidence les acides gras saturés et insaturés
présents dans la chair lyophilisée.
Les plaques utilisées sont imprégnées soit par la paraffine à 5% dans l’éther de pétrole, soit au
dodécane à 15% dans l’éther de pétrole.