Troisième partie
Résultats et discussion
f
54
Imprégnation des couches par la paraffine
Dans ce 4
ème essai, on a imprégné les couches par la paraffine pour rendre la phase
stationnaire moins polaire et le système éluant (acétonitrile : acétone (1:1)) plus polaire. On a
déposé les lipides extraits par le chloroforme et l’acide linoléique comme étalon. On a réussi à
identifier l’acide linoléique chez toutes les espèces étudiées (tableau N° III.15, figure
N° III.6).
Imprégnation des couches au dodécane
Le système éluant recommandé selon la littérature (Randerrat. K, 1971) est l’acétonitrile /
acétone (1:1) ( solvants plus polaires que la phase stationnaire), dans ce 5
ème essai, après un
parcours de la phase mobile de 12,1 cm et un temps de développement de 70 min, on a
identifier l’acide palmitique (tableau N° III.16 et figure N° III.7).
Le dernier essai (6
ème
) à titre expérimental, a porté sur des lipides extraits par l’éther
éthylique, en utilisant un système éluant : éther de pétrole- éther éthylique- acide acétique
glacial (80:20:1) a permis de révéler quatre taches après la pulvérisation de la plaque par
l’acide phospho-molibdique . En absence de standards et de la littérature on a seulement
identifier un composant dont le RF est proche du RF donné dans la littérature (Randerrat. K,
1971), qui révèle la présence de l’acide stéarique.
Conclusion
La technique de séparation sur couches minces est une méthode d'analyse qualitative
puissante; elle est simple et rapide, qui nous permet de suivre l'évolution d'une réaction, mais
révèle des inconvénients vu les difficultés de sa reproductibilité.
A partir de ces différents essais et des résultats obtenus, on constate que la polarité
moléculaire est un phénomène très important dans le domaine chromatique. Le gel de silice
(annexe II.13) est principalement utilisé comme phase stationnaire (phase polaire) pour la
chromatographie. La silice peut être rendue hydrophobe (moins polaire) par l’imprégnation
avec la paraffine ou le dodécane. Dans ce cas, on parle de chromatographie en phase inverse
car les produits les plus polaires sont élués en premier et migrent pratiquement avec le front
(solvants), alors que les produits les plus hydrophobes (moins polaires) restent fixés plus
longtemps sur la silice. Ces derniers peuvent être séparés sur une phase stationnaire polaire
(couches non imprégnées).
Pour réaliser ces essais de séparation des lipides, on a tenu compte de leur nature et donc on a
choisi des solvants de force éluante appropriée qui traduit leur polarité (annexe I.7) avec des
systèmes éluant composés de 2 à 3 solvants pour optimiser les résultats.
Résultats et discussion
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Imprégnation des couches par la paraffine
Dans ce 4
ème essai, on a imprégné les couches par la paraffine pour rendre la phase
stationnaire moins polaire et le système éluant (acétonitrile : acétone (1:1)) plus polaire. On a
déposé les lipides extraits par le chloroforme et l’acide linoléique comme étalon. On a réussi à
identifier l’acide linoléique chez toutes les espèces étudiées (tableau N° III.15, figure
N° III.6).
Imprégnation des couches au dodécane
Le système éluant recommandé selon la littérature (Randerrat. K, 1971) est l’acétonitrile /
acétone (1:1) ( solvants plus polaires que la phase stationnaire), dans ce 5
ème essai, après un
parcours de la phase mobile de 12,1 cm et un temps de développement de 70 min, on a
identifier l’acide palmitique (tableau N° III.16 et figure N° III.7).
Le dernier essai (6
ème
) à titre expérimental, a porté sur des lipides extraits par l’éther
éthylique, en utilisant un système éluant : éther de pétrole- éther éthylique- acide acétique
glacial (80:20:1) a permis de révéler quatre taches après la pulvérisation de la plaque par
l’acide phospho-molibdique . En absence de standards et de la littérature on a seulement
identifier un composant dont le RF est proche du RF donné dans la littérature (Randerrat. K,
1971), qui révèle la présence de l’acide stéarique.
Conclusion
La technique de séparation sur couches minces est une méthode d'analyse qualitative
puissante; elle est simple et rapide, qui nous permet de suivre l'évolution d'une réaction, mais
révèle des inconvénients vu les difficultés de sa reproductibilité.
A partir de ces différents essais et des résultats obtenus, on constate que la polarité
moléculaire est un phénomène très important dans le domaine chromatique. Le gel de silice
(annexe II.13) est principalement utilisé comme phase stationnaire (phase polaire) pour la
chromatographie. La silice peut être rendue hydrophobe (moins polaire) par l’imprégnation
avec la paraffine ou le dodécane. Dans ce cas, on parle de chromatographie en phase inverse
car les produits les plus polaires sont élués en premier et migrent pratiquement avec le front
(solvants), alors que les produits les plus hydrophobes (moins polaires) restent fixés plus
longtemps sur la silice. Ces derniers peuvent être séparés sur une phase stationnaire polaire
(couches non imprégnées).
Pour réaliser ces essais de séparation des lipides, on a tenu compte de leur nature et donc on a
choisi des solvants de force éluante appropriée qui traduit leur polarité (annexe I.7) avec des
systèmes éluant composés de 2 à 3 solvants pour optimiser les résultats.