Première partie
Etude bibliographique
22
III.3-Chromatographie: Aspects généraux
Le terme chromatographie, du grec khromatos (couleur) et graphes (écrire), fut employé tout
d'abord par le botaniste russe Michael Tswett en 1906 pour décrire la séparation de pigments
végétaux en zones colorées distinctes.
Bien que la plupart des séparations concernent de nos jours des composés incolores, le terme
initial de chromatographie a été conservé (Browning.D.R et al, 1971).
La découverte des principaux modes de chromatographie apparaît dans la liste suivante par
ordre chronologique :
la chromatographie sur couche mince (CCM) (1938).
la chromatographie sur papier (1944).
la chromatographie en phase gazeuse (CPG) (1952).
la chromatographie sur gel (1959).
la chromatographie liquide à haute pression (CLHP) (1967).
La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur les différences
d'affinités des substances à analyser à l'égard de deux phases, l'une stationnaire ou fixe, l'autre
mobile.
Sous le nom de méthodes chromatographiques, sont regroupées un très grand nombre de
techniques dont la dénomination est précisée selon :
la nature physique des phases ;
le principe du phénomène mis en œuvre ;
le procédé opératoire (Mahuzier G et al, 1999).
III.3.1- la chromatographie sur couche mince (CCM)
La chromatographie sur couche mince (CCM) repose principalement sur des phénomènes
d'adsorption : la phase mobile est un solvant ou un mélange de solvants, qui progresse le long
d'une phase stationnaire fixée sur une plaque de verre ou sur une feuille semi-rigide de
matière plastique ou d'aluminium. Après que l'échantillon ait été déposé sur la phase
stationnaire, les substances migrent à une vitesse qui dépend de leur nature et de celle du
solvant.
La CCM est une méthode d'une mise en œuvre beaucoup plus simple, ne nécessitant, en
général, qu'un appareillage élémentaire et de ce fait très peu coûteux (Rosset R. et al, 1982)
Les principaux éléments d'une séparation chromatographique sur couche mince sont:
• la cuve chromatographique : un récipient habituellement en verre, de forme variable, fermé
par un couvercle étanche.
• la phase stationnaire : une couche d'environ 0,25 mm de gel de silice.
• l'éluant : un solvant pur ou un mélange : il migre lentement le long de la plaque en
entraînant les composants de l'échantillon.
Etude bibliographique
22
III.3-Chromatographie: Aspects généraux
Le terme chromatographie, du grec khromatos (couleur) et graphes (écrire), fut employé tout
d'abord par le botaniste russe Michael Tswett en 1906 pour décrire la séparation de pigments
végétaux en zones colorées distinctes.
Bien que la plupart des séparations concernent de nos jours des composés incolores, le terme
initial de chromatographie a été conservé (Browning.D.R et al, 1971).
La découverte des principaux modes de chromatographie apparaît dans la liste suivante par
ordre chronologique :
la chromatographie sur couche mince (CCM) (1938).
la chromatographie sur papier (1944).
la chromatographie en phase gazeuse (CPG) (1952).
la chromatographie sur gel (1959).
la chromatographie liquide à haute pression (CLHP) (1967).
La chromatographie est une méthode physique de séparation basée sur les différences
d'affinités des substances à analyser à l'égard de deux phases, l'une stationnaire ou fixe, l'autre
mobile.
Sous le nom de méthodes chromatographiques, sont regroupées un très grand nombre de
techniques dont la dénomination est précisée selon :
la nature physique des phases ;
le principe du phénomène mis en œuvre ;
le procédé opératoire (Mahuzier G et al, 1999).
III.3.1- la chromatographie sur couche mince (CCM)
La chromatographie sur couche mince (CCM) repose principalement sur des phénomènes
d'adsorption : la phase mobile est un solvant ou un mélange de solvants, qui progresse le long
d'une phase stationnaire fixée sur une plaque de verre ou sur une feuille semi-rigide de
matière plastique ou d'aluminium. Après que l'échantillon ait été déposé sur la phase
stationnaire, les substances migrent à une vitesse qui dépend de leur nature et de celle du
solvant.
La CCM est une méthode d'une mise en œuvre beaucoup plus simple, ne nécessitant, en
général, qu'un appareillage élémentaire et de ce fait très peu coûteux (Rosset R. et al, 1982)
Les principaux éléments d'une séparation chromatographique sur couche mince sont:
• la cuve chromatographique : un récipient habituellement en verre, de forme variable, fermé
par un couvercle étanche.
• la phase stationnaire : une couche d'environ 0,25 mm de gel de silice.
• l'éluant : un solvant pur ou un mélange : il migre lentement le long de la plaque en
entraînant les composants de l'échantillon.