Matériels et méthodes
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CaCO 3 + 2HCl → CO 2 +CaCl 2
B-2-2-mode opératoire :
• Peser 20g (p1: poids initial) du sédiment sec dans une tare.
• Décalcification à l’HCl, après effervescence; rinçage et séchage complet de l’échantillon dans
une étuve à 105°C pendant 24h.
• Pesage du sédiment décalcifié sec (p2).
La différence entre le poids du sédiment sec brut et le poids du sédiment décarbonaté représente le
poids du calcaire (p):
P (g) = p1-p2
Le taux de carbonates existant dans le sédiment est donné par la formule suivante:
CaCo 3 (%)= (P1-P2).100/P1
3-4-Etude bactériologique :
3-4-l’échantillonnage :
Pour examen bactériologique doit être effectué sur un échantillon correctement prélevé, dans des
flacons stériles, selon un mode opératoire précis évitant toute contamination accidentelle, correctement
transporté au laboratoire et analysé après une courte durée de conservation dans des conditions
satisfaisantes(Manul & al, 1989).
• Les échantillons sont prélevés dans des flacons en verre stérilisés au four à 170°C
pendant une heure de 500ml dans trois stations sur côte.
• Les flacons sont ouverts, remplis sous l’eau pour évité toute contamination avec l’air.
• Les échantillons sont transportés dans une glacière (4°C) à l’abri de la lumière.
3-4-2-le dénombrement bactérie :
La méthode de filtration sur membrane consiste à recueillir, sur une membrane stérile, un volume
donnée de produit à analyser.
La membrane est ensuit déposée sur un milieu nutritif convenable ; après incubation, les colonies sont
dénombrer et identifier. (Chapmpiat & al, 1994) in (Samari, 2008).
• Le matériel :
• Bec-bensen pour la stérilisation de la zone de travail.
• Boite Pétri avec les milieux des cultures spécifiques pour chaque germe.
• Membranes d’ester de cellulose, filtrantes stériles quadrillées de porosité de 0,45µm,
et de 49mmµ X 9mm de diamètre susceptible de retenir les bactéries.
• Incubateur dont la température est ajustée selon le germe étudie.
• Pince stérilisée.
• Pipette.
• Pompe à vide.
• Les milieux et les réactifs :
3- 4-3-L’analyse microbiologique :
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CaCO 3 + 2HCl → CO 2 +CaCl 2
B-2-2-mode opératoire :
• Peser 20g (p1: poids initial) du sédiment sec dans une tare.
• Décalcification à l’HCl, après effervescence; rinçage et séchage complet de l’échantillon dans
une étuve à 105°C pendant 24h.
• Pesage du sédiment décalcifié sec (p2).
La différence entre le poids du sédiment sec brut et le poids du sédiment décarbonaté représente le
poids du calcaire (p):
P (g) = p1-p2
Le taux de carbonates existant dans le sédiment est donné par la formule suivante:
CaCo 3 (%)= (P1-P2).100/P1
3-4-Etude bactériologique :
3-4-l’échantillonnage :
Pour examen bactériologique doit être effectué sur un échantillon correctement prélevé, dans des
flacons stériles, selon un mode opératoire précis évitant toute contamination accidentelle, correctement
transporté au laboratoire et analysé après une courte durée de conservation dans des conditions
satisfaisantes(Manul & al, 1989).
• Les échantillons sont prélevés dans des flacons en verre stérilisés au four à 170°C
pendant une heure de 500ml dans trois stations sur côte.
• Les flacons sont ouverts, remplis sous l’eau pour évité toute contamination avec l’air.
• Les échantillons sont transportés dans une glacière (4°C) à l’abri de la lumière.
3-4-2-le dénombrement bactérie :
La méthode de filtration sur membrane consiste à recueillir, sur une membrane stérile, un volume
donnée de produit à analyser.
La membrane est ensuit déposée sur un milieu nutritif convenable ; après incubation, les colonies sont
dénombrer et identifier. (Chapmpiat & al, 1994) in (Samari, 2008).
• Le matériel :
• Bec-bensen pour la stérilisation de la zone de travail.
• Boite Pétri avec les milieux des cultures spécifiques pour chaque germe.
• Membranes d’ester de cellulose, filtrantes stériles quadrillées de porosité de 0,45µm,
et de 49mmµ X 9mm de diamètre susceptible de retenir les bactéries.
• Incubateur dont la température est ajustée selon le germe étudie.
• Pince stérilisée.
• Pipette.
• Pompe à vide.
• Les milieux et les réactifs :
3- 4-3-L’analyse microbiologique :