Chapitre III
Matériels et méthodes
24
III.2.2. Analyse des sels nutritifs
Ce sont des éléments chimiques indispensables à la synthèse autotrophe de la matière organique. Le
terme est souvent réservé aux éléments dont la concentration constitue parfois un facteur limitant, ces
éléments sont : Azote N, Phosphore P, Silicium Si, (Lacaze, 1996).
A fin de minimiser les risques de contamination, les flacons de prélèvement d’eau ont subit le
prétraitement suivant :
Rinçage à l’eau de robinet.
Rinçage à l’eau acidulée (HCl à 5%).
Rinçage à l’eau bi-distillée deux fois et fermeture hermétique et immédiate du flacon.
Lors du prélèvement à bord, chaque flacon est rincé deux fois avec l’eau de l’échantillon avant son
remplissage.
III.2.2.1. Dosage des sels nutritifs
L’analyse des sels nutritifs est faite par la méthode de colorimétrie à flux continu sur chaine
automatisée SKALAR (Auto-analyser San Plus) (troisième génération), selon les protocoles décrits
par le constructeur SKALAR (photo III.18). Le fonctionnement de l’appareil repose sur un principe
dynamique, celui de l’analyse liquide en flux continu :
Une veine liquide propulsée en continu par une pompe péristaltique dans un circuit analytique
spécifique à chaque paramètre analysé. Les réactions chimiques s’effectuent dans cette veine en
progression. L’analyse des échantillons est réalisée par séquence, ce qui permet une grande cadence de
travail. Cette chaine de mesure automatisée est totalement pilotée par un micro ordinateur doté d’un
logiciel spécifique.
A la fin de l’analyse, ce dernier fourni un fichier numérique contenant les résultats accompagnés de
toutes les informations relatives à l’analyse.
III.2.2.2. Principe de dosage des sels nutritifs
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, orthophosphates et
silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels réagissent dans certaines
conditions (température, pH, présence de catalyseurs, …etc) avec des réactifs spécifiques pour donner
une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’onde (λ). (Annexe II).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier est
d’autant plus important que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique (D.O),
obéit à la loi de Beer-Lambert qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O = log (I 0 -I) = ε.L.C (III.5).
Photos. III.18.
Auto Analyser San Plus (SKALAR
® 1996)
Matériels et méthodes
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III.2.2. Analyse des sels nutritifs
Ce sont des éléments chimiques indispensables à la synthèse autotrophe de la matière organique. Le
terme est souvent réservé aux éléments dont la concentration constitue parfois un facteur limitant, ces
éléments sont : Azote N, Phosphore P, Silicium Si, (Lacaze, 1996).
A fin de minimiser les risques de contamination, les flacons de prélèvement d’eau ont subit le
prétraitement suivant :
Rinçage à l’eau de robinet.
Rinçage à l’eau acidulée (HCl à 5%).
Rinçage à l’eau bi-distillée deux fois et fermeture hermétique et immédiate du flacon.
Lors du prélèvement à bord, chaque flacon est rincé deux fois avec l’eau de l’échantillon avant son
remplissage.
III.2.2.1. Dosage des sels nutritifs
L’analyse des sels nutritifs est faite par la méthode de colorimétrie à flux continu sur chaine
automatisée SKALAR (Auto-analyser San Plus) (troisième génération), selon les protocoles décrits
par le constructeur SKALAR (photo III.18). Le fonctionnement de l’appareil repose sur un principe
dynamique, celui de l’analyse liquide en flux continu :
Une veine liquide propulsée en continu par une pompe péristaltique dans un circuit analytique
spécifique à chaque paramètre analysé. Les réactions chimiques s’effectuent dans cette veine en
progression. L’analyse des échantillons est réalisée par séquence, ce qui permet une grande cadence de
travail. Cette chaine de mesure automatisée est totalement pilotée par un micro ordinateur doté d’un
logiciel spécifique.
A la fin de l’analyse, ce dernier fourni un fichier numérique contenant les résultats accompagnés de
toutes les informations relatives à l’analyse.
III.2.2.2. Principe de dosage des sels nutritifs
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, orthophosphates et
silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels réagissent dans certaines
conditions (température, pH, présence de catalyseurs, …etc) avec des réactifs spécifiques pour donner
une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d’onde (λ). (Annexe II).
L’absorption de l’énergie lumineuse dépend de l’intensité de la coloration, de même, ce dernier est
d’autant plus important que la solution est concentrée en sel dosé.
La quantité de lumière absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique (D.O),
obéit à la loi de Beer-Lambert qui est exprimée par la relation suivante :
A = D.O = log (I 0 -I) = ε.L.C (III.5).
Photos. III.18.
Auto Analyser San Plus (SKALAR
® 1996)