Chapitre III
Matériels et méthodes
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de méthanol. Le protocole utilisé au cours de la compagne Médipord VI a été précédemment décrit par
Herbland et al. (1985) et Raimbault et al. (1988).
Les échantillons d’eau de mer prélevés (250 ml) sont filtrés sur un filtre en fibre de verre (filtre
Whatman GF/F de diamètre de 25 mm). La dépression utilisée pour la filtration est toujours inférieure
à 100 mm Hg. Immédiatement après la filtration, le filtre est placé dans un tube de verre contenant 7
ml de méthanol pur. La teneur en eau résiduelle sur le filtre après filtration étant de 0.19 ± 0.02 ml
(test effectué sur 12 filtres), l’extraction s’effectué dans 5.2 ml de méthanol à 97 %. Le tube bouché est
ensuite placé à l’obscurité et la température de 5°C dans le réfrigérateur du bord, pour une période
d’extraction de 30 minutes.
Après ce délai, la fluorescence des échantillons est mesurée sur un Turner Desings 10.005 R, équipé
pour la détermination de la chlorophylle-a (lampe F4T4 BL, filtre primaire Corning 5-60, filtre
secondaire Corning 2-(F a ). les concentrations sont évaluées d’après la formule de Lorenzen
(1966) :
K 0 : coefficient d’étalonnage du fluorimètre pour la chlorophylle a.
K a : coefficient d’étalonnage du fluorimètre pour la chlorophylle a acidifiée
F 0 : fluorescence avant acidification.
F a : fluorescence après acidification.
v : volume d’extraction.
V : volume filtré.
Chlorophylle-a = (F 0 -F a ) / (K 0 -K a ) x (v/V). (III.4).
Photo.11.
Filtres dans le papier
aluminium après filtration
Photo.12.
Méthanol Pur
Photo.13.
Filtre + méthanol
dans un tube en verre
Photo.14.
Les standards
Photo.15.
Agitateur
Photo.16.
Centrifugeuse
Photo.17.
Fluorimètre