Chapitre III : Matériels et Méthodes
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3.5.2.3. Homogénéisation
Pour avoir une meilleure répartition des composés pétroliers, les sédiments sont
homogénéisés pendant 15 mn à l’aide d’un agitateur électrique (type Heidolph).
3.4.2.4. Extraction des hydrocarbures
Un extracteur soxhlet permet la libération des hydrocarbures présents dans le sédiment.
5g de sédiment lyophilisé sont introduits dans une cartouche en cellulose (watman)
préalablement rincée à l’hexane : 1g de Na 2 SO 4 est également introduit dans la
cartouche.
Un mélange binaire de solvant, composé d’hexane et de dichlorométhane dans des
proportions égales en volume, assure le lavage du sédiment et ainsi l’extraction des
hydrocarbures.
L’extraction proprement dite dure 8h. A chaque série de quatre échantillons, un blanc de
procédure est réalisé.
3.5.2.5. Concentration des extraits
L’extrait récupéré, environ 120 ml, est concentré à l’évaporateur rotatif jusqu’à un
volume de 10 ml environ (T° 40C° ; P 1,5 bars), puis sous jet d’azote jusqu’à 2 ml.
• Elimination des composés soufrés :
Présents en grandes proportions dans les sédiments soumis à des apports anthropiques,
les composés soufrés interfèrent dans l’analyse des hydrocarbures par chromatographie
en phase gazeuse (CPG). Le protocole analytique prévoit dans ce cas, leur élimination
par un traitement au mercure. Celui-ci consiste à l’introduction de deux gouttes d’Hg
dans l’extrait des hydrocarbures, suivie de l’agitation du tube pendant 2minutes. Le
mercure en piégeant les composés soufrés, noirci.
3.5.2.6. Purification et fractionnement des extraits
Cette étape permet l’élimination des hydrocarbures polaires en particuliers, les lipides
extraits en même temps que les hydrocarbures. Elle se fait, comme pour les
hydrocarbures dissous/dispersés, par chromatographie liquide sur colonne ouverte en
utilisant l’alumine et le gel de silice comme adsorbants.
1. Préparation de la colonne
Une burette de 30 ml de contenance et de 10 mm de diamètre interne est remplie
successivement par :
• du coton de verre.
• 20 ml d’hexane.
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3.5.2.3. Homogénéisation
Pour avoir une meilleure répartition des composés pétroliers, les sédiments sont
homogénéisés pendant 15 mn à l’aide d’un agitateur électrique (type Heidolph).
3.4.2.4. Extraction des hydrocarbures
Un extracteur soxhlet permet la libération des hydrocarbures présents dans le sédiment.
5g de sédiment lyophilisé sont introduits dans une cartouche en cellulose (watman)
préalablement rincée à l’hexane : 1g de Na 2 SO 4 est également introduit dans la
cartouche.
Un mélange binaire de solvant, composé d’hexane et de dichlorométhane dans des
proportions égales en volume, assure le lavage du sédiment et ainsi l’extraction des
hydrocarbures.
L’extraction proprement dite dure 8h. A chaque série de quatre échantillons, un blanc de
procédure est réalisé.
3.5.2.5. Concentration des extraits
L’extrait récupéré, environ 120 ml, est concentré à l’évaporateur rotatif jusqu’à un
volume de 10 ml environ (T° 40C° ; P 1,5 bars), puis sous jet d’azote jusqu’à 2 ml.
• Elimination des composés soufrés :
Présents en grandes proportions dans les sédiments soumis à des apports anthropiques,
les composés soufrés interfèrent dans l’analyse des hydrocarbures par chromatographie
en phase gazeuse (CPG). Le protocole analytique prévoit dans ce cas, leur élimination
par un traitement au mercure. Celui-ci consiste à l’introduction de deux gouttes d’Hg
dans l’extrait des hydrocarbures, suivie de l’agitation du tube pendant 2minutes. Le
mercure en piégeant les composés soufrés, noirci.
3.5.2.6. Purification et fractionnement des extraits
Cette étape permet l’élimination des hydrocarbures polaires en particuliers, les lipides
extraits en même temps que les hydrocarbures. Elle se fait, comme pour les
hydrocarbures dissous/dispersés, par chromatographie liquide sur colonne ouverte en
utilisant l’alumine et le gel de silice comme adsorbants.
1. Préparation de la colonne
Une burette de 30 ml de contenance et de 10 mm de diamètre interne est remplie
successivement par :
• du coton de verre.
• 20 ml d’hexane.