Chapitre Ш
Matériel et méthodes
34
Ka : Coefficient d'étalonnage établie avec de la chlorophylle a pure après acidification
VE : Le volume D’extraction (VE = 7 ml) ;
VF : Le volume de l’échantillon filtré (VF = 250 ml).
Ш.2.3. Analyse des paramètres chimiques
Ш.2.3.1. Dosage des sels nutritifs
Méthode d’analyse
L'analyse automatique des sels nutritifs consiste à réaliser automatiquement les
différentes manipulations nécessaires à un dosage manuel : prélèvements, analyse et
lecture (Rodier et al, 1996).
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs s'est fait par colorimétrie à flux continu sur
chaîne automatisée « Auto-Analyser San Plus » S.F.A.S troisième génération (Fig.17
annexe I) selon les protocoles définis par le fabricant (SKALAR
®
, 1998).
Le fonctionnement de l'appareil repose sur un principe dynamique simple, celui de
l'analyse liquide en flux continu :
Une veine liquide progresse par l'intermédiaire d'une pompe péristaltique en continu. Les
réactions chimiques s'effectuent dans cette veine en progression. L'analyse des échantillons
est réalisée par séquence, ce qui permet une grande cadence de travail.
Le mode opératoire détaillé pour le dosage de chaque sel ainsi que les réactifs utilisés
sont consignés en annexe I.
Principe de dosage des sels nutritifs dans l'eau :
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, ortho
phosphates et silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels réagissent
dans certaines conditions (température, pH, présence de catalyseurs, ...) avec des réactifs pour
donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d'onde (λ).
L'absorption de l'énergie lumineuse dépend de l'intensité de la coloration. Cette dernière est
d'autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé. La quantité de lumière
absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique (D.O), obéit à la loi de
Beer-Lambert qui est exprimée par l'expression suivante :
Avec :
I 0 et I : sont respectivement l'intensité lumineuse incidente et émergente du
milieu absorbant.
A : est l’absorbance du milieu.
D.O : est la densité optique.
A = D.O = Ln (I/ I 0 ) = ε.L.C
Matériel et méthodes
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Ka : Coefficient d'étalonnage établie avec de la chlorophylle a pure après acidification
VE : Le volume D’extraction (VE = 7 ml) ;
VF : Le volume de l’échantillon filtré (VF = 250 ml).
Ш.2.3. Analyse des paramètres chimiques
Ш.2.3.1. Dosage des sels nutritifs
Méthode d’analyse
L'analyse automatique des sels nutritifs consiste à réaliser automatiquement les
différentes manipulations nécessaires à un dosage manuel : prélèvements, analyse et
lecture (Rodier et al, 1996).
Dans notre étude, le dosage des sels nutritifs s'est fait par colorimétrie à flux continu sur
chaîne automatisée « Auto-Analyser San Plus » S.F.A.S troisième génération (Fig.17
annexe I) selon les protocoles définis par le fabricant (SKALAR
®
, 1998).
Le fonctionnement de l'appareil repose sur un principe dynamique simple, celui de
l'analyse liquide en flux continu :
Une veine liquide progresse par l'intermédiaire d'une pompe péristaltique en continu. Les
réactions chimiques s'effectuent dans cette veine en progression. L'analyse des échantillons
est réalisée par séquence, ce qui permet une grande cadence de travail.
Le mode opératoire détaillé pour le dosage de chaque sel ainsi que les réactifs utilisés
sont consignés en annexe I.
Principe de dosage des sels nutritifs dans l'eau :
La méthode utilisée pour le dosage des sels nutritifs (ammonium, nitrites, nitrates, ortho
phosphates et silicates) est basée sur une réaction de coloration. En effet, ces sels réagissent
dans certaines conditions (température, pH, présence de catalyseurs, ...) avec des réactifs pour
donner une coloration absorbant la lumière à une certaine longueur d'onde (λ).
L'absorption de l'énergie lumineuse dépend de l'intensité de la coloration. Cette dernière est
d'autant plus importante que la solution est concentrée en sel dosé. La quantité de lumière
absorbée par la solution, appelée absorbance (A) ou densité optique (D.O), obéit à la loi de
Beer-Lambert qui est exprimée par l'expression suivante :
Avec :
I 0 et I : sont respectivement l'intensité lumineuse incidente et émergente du
milieu absorbant.
A : est l’absorbance du milieu.
D.O : est la densité optique.
A = D.O = Ln (I/ I 0 ) = ε.L.C