Chapitre Ш
Matériel et méthodes
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 ε : est le coefficient d'extinction molaire (varie en fonction de la température et
de la longueur d'onde).
 L : est la longueur du milieu traversée exprimée en cm.
 C : est la concentration de la solution absorbante exprimée en mol/l.
 Matériel utilisé :
- Auto-Analyser San Plus Système de marque SKALAR, 1998 ;
- Bi-distillateur MILLI-Q Reagent Water System, balance, spatules, béchers et étuve ;
- Deux micropipettes Fortuna avec éjecteur d’embouts de type DIGITAL, une de 200 à
1000 µl et l’autre de 20 à 250 µl. des fioles de 100 et 500 µl ;
Ш.2.3.1.1. Principe de dosage de l’azote ammoniacal (NH 4
+
)
Le principe de base est la réaction de Berthelot, ou l’ammoniac, en milieu basique, réagit
tout d’abord avec l’hypochlorite pour former une monochloramine, puis successivement avec
deux molécules de phénol pour former le bleu d’indophénol absorbant à 630 nm (SKALAR
R
1998).
Schématiquement, la réaction s’écrit comme suit : (Aminot et kérouel, 2004).
NH 3 + 3ClO
- + 2C 6 H 5 O
-
O = C 6 H 4 =N-C 6 H 4 O
- + 2H 2 O + OH
- + 3Cl
-
Ш.2.3.1.2. Principe de dosage de l’azote Nitreux (NO 2
-
)
La méthode repose sur la réaction de Griess adaptée à l’eau de mer par Benshneider et
Robinson (1952). Le composé final (rose) absorbé à 543 nm est obtenue par réaction du
nitrite tout d’abord avec la sulfanilamide (formation d’un diazoïque), puis avec le N-naphtyleéthylène diamine (NED), en milieu acide (le pH doit être strictement inférieur à 2) (Aminot
et kérouel, 2004).
Ш.2.3.1.3. Principe de dosage de l’azote Nitrique (NO 3
-
)
Le principe de base repose sur la réduction quasi quantitative (> 95%) du nitrate (NO 3
-
) en
nitrite (NO 2
-
). En effet, le dosage du nitrite étant simple, spécifique et sensible, il permet la
mesure des faibles concentrations océaniques de nitrate. Après réduction, on mesure en réalité
la somme des concentrations en nitrate et nitrite.
La réduction est effectuée en milieu hétérogène par contact avec du cadmium
"amalgamé" au cuivre, technique développée à l’origine par Wood et al (1967) (Aminot et
kérouel, 2004).
Ш.2.3.1.4. Principe de dosage des phosphates (PO 4
-3 )
La méthode du dosage manuel du phosphate en eau de mer est adaptée par Murphy et
Riley (1962), elle repose sur la réaction du phosphate avec le molybdate, en présence
d’antimoine, pour former le complexe phosphomolybdique, qui est ensuite réduit par l’acide
ascorbique en un composé bleu absorbant à 885 nm (Aminot et kérouel, 2004).