Troisième partie : Résultat et discussions
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a) Mode opératoire :
Déposer, sur une lame porte-objet propre, un disque « Ox » et l’imbiber avec une
goutte d’eau distillée ou d’eau physiologique stérile. Prélever une partie de la colonie à
étudier à l’aide d’une pipette Pasteur boutonnée stérile et l’étaler sur le disque.
Une coloration violet foncé apparaît immédiatement sur le disque ou en quelques secondes
puis vire au noir indique que la bactérie produit une oxydase (DELARRAS, 2007).
15.3.
Recherche de la catalase:
La catalase est une enzyme présente chez la plupart des bactéries aérobies strictes et
anaérobies facultatives (DELARRAS, 2007). Cette enzyme catalyse la décomposition du
peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ) qui est produit par certaines réactions cellulaires et très
toxiques, donc c’est l’une des enzymes chargée d’éponger l’eau oxygéné par la dismutation
(PELMONT, 1993). La réaction catalysée est la suivante :
a) Mode opératoire :
 sur une lame propre, séchée, on dépose une goutte d’eau oxygénée à 10
volumes,
 a l’aide d’une pipette Pasteur on ajoute un fragment d’une colonie bactérienne
bien isolée,
 L’observation se fait immédiatement :
o catalase(+) : apparition de bulles dues au dégagement gazeux de
dioxygène,
o catalase(-): pas de réaction.
15.4.
Recherche de la Coagulase:
Ce test sert à déterminer si la bactérie est capable de coaguler le plasma par l’action de
l’enzyme coagulase.
Mode opératoire :
 mettre dans un tube à hémolyse stérile 0,5 ml de plasma du lapin et une colonie
suspecte,
2H 2 O 2
O 2 + 2H 2 O