Troisième partie : Résultat et discussions
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7. Recherche de Salmonella :
La recherche de salmonella a été effectuée selon les recommandations de JOFFIN et
JOFFIN, 2010 (figure 06).
A. Mode opératoire:
Pré enrichissement :
 peser 25g de la chair et ajouter 225ml de bouillon au sélénite et à la
cystéine,
 broyer le contenu à l'aide d'un robot mixeur stérile pendant 2 min et le
verser aseptiquement dans un flacon stérile, puis incubé à 37°C
pendant 24 heures.
Enrichissement :
 nous avons utilisé deux milieux pour l'enrichissement sélectifs: bouillon
au sélénite et à la cystéine (BSC) et le bouillon Rappaport-Vassiliadis
(BRV),
 transférer 0,1 ml de bouillon de pré-enrichissement dans un tube
contenant 10 ml de BRV, incubé à 44°C pendant 24h,
 transférer 1ml de bouillon de pré enrichissement dans un tube contenant
10 ml de BSC, incubé à 37°C ±1°C pendant 24h.
Ensemencement :
 les cultures sur BSC et BRV sont repiquées sur la gélose Hektoen et sur
la gélose SS,
 l'ensemencement du milieu est effectué par stries, incubé à 37°C
pendant 24 heures.
B. Lecture :
Les colonies de Salmonella présumées apparaissent vertes ou bleues avec ou
sans centre noir sur gélose Hektoen et transparentes avec ou sans centre noir sur
gélose SS (ANONYME 2, 2010). La coloration noire est due à la formation de
H 2 S.
C. Identification ;
3 colonies caractéristiques et distinctes font l'objet d'une identification
morphologique et biochimique qui se déroule comme suit :
-aspect des colonies sur milieu sélectif.