Deuxième partie : Matériel et méthodes
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5. Dénombrement en milieu liquide :
A. La méthode du nombre le plus probable (NPP) :
 effectuer une série de dilutions décimales à partir de la suspension mère,
 ensemencer trois tubes contenant 9ml de milieu de culture par 1 ml de la suspension
mère et chaque dilution,
 après culture et incubation, procéder à la lecture des résultats en comptant positifs les
tubes qui présentent une activité biologique (virage d’indicateur coloré, dégagement
de gaz,…) et négatifs les autres (GUIRAUD et ROSEC, 2004).
6. Dénombrement de la flore mésophile totale suivant la norme ISO 4833 ;
février 2003 (figure 05).
A. Mode opératoire:
On prélève 1 ml de chaque dilution (10
-1
, 10
-2
, 10
-3
, 10
-4
) qu’on introduit
aseptiquement dans les boîtes de Pétri. On y ajoute 15 ml de milieu PCA (Plate Count
Agar) en surfusion. Le mélange est homogénéisé par des mouvements circulaires des
boites. Elles sont ensuite incubées à 37°C. Le comptage se fait après 72 heures
d’incubation.
B. Lecture :
On dénombre les colonies dans les boites qui contiennent au moins 30 et au plus 300 colonies.