MATERIEL ET METHODES
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Technique
A partir d’une culture jeune (18-24h), préparer dans 5ml d’eau physiologique une
suspension bactérienne de 0,5McFarland (10
8
cellules/ml).
ajuster l’inoculum à 10
7
cellules/ml.
plonger un écouvillon stérile dans la suspension bactérienne de 10
7
cellules/ml;
ensemencer la boite en frottant l’écouvillon sur la totalité de la surface gélosée et en
tournant la boite trois fois de 60° afin d’assurer une bonne distribution de l’inoculum;
appliquer les disques d’antibiotiques (tableau 3) à l’aide d’un distributeur stérile
selon le schéma de la (figure 10);
laisser diffusé pendant 15 minutes, à température ambiante;
Incuber à 37°C pendant 18-24h.
Lecture
Mesurer avec précision les diamètres d’inhibition à l’aide d’une règle graduée ou pied à
coulisse et classer les bactéries dans l’une des catégories : sensible (S), intermédiaire (I) ou
résistant (R) selon les valeurs critiques (CA-SFM., 2010).
Figure 10 : Schéma de la disposition des antibiotiques
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Caractérisation des mécanismes de résistance aux béta-lactamines chez des bactéries à Gram négatif isolées des eaux usées et aux traitées de la STEP de Boumerdes - 37/81

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