Matériels et Méthodes
Figure 17: Extraction des lipides
a. Extrait de lipide à partir de la poudre microalgale. b. élimination du solvant dans un évaporateur rotatif.
Calcul du rendement :
II-8-2- Dosage des protéines :
La méthode préconisée est celle décrite par (Lowry et al., 1951), un sel de cuivre
en milieu alcalin forme un complexe coloré avec les peptides. L’addition du réactif de
folin-Ciocalteu (acide phosphotungstique et molybdique) produit une coloration bleufoncé due à la fois à la réaction du cuivre sur les liaisons peptidiques et à la réduction de
l’acide phosphotungstomolybdique par la tyrosine, le tryptophane et la cystéine.
Réactifs :
Préparation des réactifs (Figure18.a) :
Réactif A : dissoudre 0.5g de CuSO 4. 5H2O et 1g de citrate de sodium dans 100ml d’eau.
Cette solution est stable indéfiniment (ce n’est pas le cas du mélange sulfate de cuivre et
tartrate de la méthode originelle).
Réactif B : dissoudre 20g de Na2CO3 et 4g de NaOH dans 1 litre d’eau.
Réactif C : ajouter 1ml de réactif A à 50 ml de réactif B.
Réactif D : diluer 1 volume de réactif de Folin- Ciocalteu par 1 volume d’eau.
a
b
R = (masse des lipides/masse de la poudre d’algue) x100
Page | 34
Figure 17: Extraction des lipides
a. Extrait de lipide à partir de la poudre microalgale. b. élimination du solvant dans un évaporateur rotatif.
Calcul du rendement :
II-8-2- Dosage des protéines :
La méthode préconisée est celle décrite par (Lowry et al., 1951), un sel de cuivre
en milieu alcalin forme un complexe coloré avec les peptides. L’addition du réactif de
folin-Ciocalteu (acide phosphotungstique et molybdique) produit une coloration bleufoncé due à la fois à la réaction du cuivre sur les liaisons peptidiques et à la réduction de
l’acide phosphotungstomolybdique par la tyrosine, le tryptophane et la cystéine.
Réactifs :
Préparation des réactifs (Figure18.a) :
Réactif A : dissoudre 0.5g de CuSO 4. 5H2O et 1g de citrate de sodium dans 100ml d’eau.
Cette solution est stable indéfiniment (ce n’est pas le cas du mélange sulfate de cuivre et
tartrate de la méthode originelle).
Réactif B : dissoudre 20g de Na2CO3 et 4g de NaOH dans 1 litre d’eau.
Réactif C : ajouter 1ml de réactif A à 50 ml de réactif B.
Réactif D : diluer 1 volume de réactif de Folin- Ciocalteu par 1 volume d’eau.
a
b
R = (masse des lipides/masse de la poudre d’algue) x100
Page | 34