Matériels et Méthodes
Figure 10: Photographies du traitement par les antibiotiques
a. filtration d’antibiotiques, b. préparation au traitement.
Etape 2 : Traitement par antibiotiques.
- 1ml de la culture en tube a été aseptiquement transféré dans 2 Erlenmeyers de 100ml
contenant 50ml du milieu de culture.
- Un Erlenmeyer ne doit pas contenir de l’antibiotiques et dans l’autre Erlenmeyer on a
ajouté 0.5ml d’antibiotiques (Stein, 1973 ; Andersen, 2005).
- Les erlenmeyers ont été incubés en conditions favorables (lumière et température).
- Après 24 heures d’incubations, 4ml des deux Erlenmeyers ont été transférés dans des
tubes de centrifugeuse stériles, les culots récupérez ont été lavés 2 fois par l’eau
distillée stérile.
- A la fin, 0.1 ml du culot liquide a été prélevé et étalé sur gélose nutritive (GN), pour
vérifier l’efficacité du traitement. Le reste du culot traité a été inoculé dans des boites
de pétri contenant de BG11.
- Les boites de GN ont été incubées dans l’étuve à 37°C pendant 48h, tandis que les
boites de BG11 ont été incubées en conditions favorables pour la croissance.
- Après 48h, un dénombrement se fait sur les boites de GN. Celles, où il y’a pas eu une
croissance de bactéries, constituent les souches purifiés, seront utilisées pour
l’inoculation de la culture.
a
b
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Figure 10: Photographies du traitement par les antibiotiques
a. filtration d’antibiotiques, b. préparation au traitement.
Etape 2 : Traitement par antibiotiques.
- 1ml de la culture en tube a été aseptiquement transféré dans 2 Erlenmeyers de 100ml
contenant 50ml du milieu de culture.
- Un Erlenmeyer ne doit pas contenir de l’antibiotiques et dans l’autre Erlenmeyer on a
ajouté 0.5ml d’antibiotiques (Stein, 1973 ; Andersen, 2005).
- Les erlenmeyers ont été incubés en conditions favorables (lumière et température).
- Après 24 heures d’incubations, 4ml des deux Erlenmeyers ont été transférés dans des
tubes de centrifugeuse stériles, les culots récupérez ont été lavés 2 fois par l’eau
distillée stérile.
- A la fin, 0.1 ml du culot liquide a été prélevé et étalé sur gélose nutritive (GN), pour
vérifier l’efficacité du traitement. Le reste du culot traité a été inoculé dans des boites
de pétri contenant de BG11.
- Les boites de GN ont été incubées dans l’étuve à 37°C pendant 48h, tandis que les
boites de BG11 ont été incubées en conditions favorables pour la croissance.
- Après 48h, un dénombrement se fait sur les boites de GN. Celles, où il y’a pas eu une
croissance de bactéries, constituent les souches purifiés, seront utilisées pour
l’inoculation de la culture.
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