Chapitre III
Matériel et méthodes
42
Cette opération est identique à celle décrite pour l’eau de mer. Le fractionnement par
chromatographie sur colonne remplie préalablement de gel de silice, alumine avec des
proportions préalablement définies à permet d’obtenir les des fractions
F1 : Fraction aliphatique après élution avec 20ml d’Hexane
F2 : fraction aromatique après élution avec 20 ml d’un mélange d’hexane/ Dichlorométhane
(50 :50)
III.3. Technique d’analyse des hydrocarbures
Différentes techniques ont été mises en œuvre pour l’analyse des polluants organiques marins.
Les méthodes spectrales avec la chromatographie en phase gazeuse offrent des résultats
particulièrement satisfaisants du point de vue quantitatif et qualitatif.
La spectroscopie est une technique d’analyse des molécules qui se base sur la manière dont
celle-ci absorbent les radiations. Parmi les techniques les plus souvent utilisées en chimie
organique, nous avons utilisé dans notre travail la spectrofluorométrie à rayonnement
ultraviolet (S.F.U.V).
III.3.1. Spectrofluorométrie à rayonnement ultraviolet (S.F.U.V)
La SFUV sensible essentiellement aux hydrocarbures aromatiques, ne permet pas un dosage
au sens strict des hydrocarbures totaux dans un échantillon marin; les teneurs mesurées ne
représentent pas réellement les concentrations absolues d'hydrocarbures. Par contre, la
réponse de fluorescence fournit un excellent indice de pollution pétrolière, du fait des très
faibles teneurs en hydrocarbures aromatiques biogènes dans le milieu marin. La SFUV est
beaucoup plus sensible que la spectroscopie Infra-Rouge : la limite de détection est de l'ordre
de 0,1 g/1 pour l’eau de mer (Roussel, 1983).
La SFUV est préconisée par la COI, (1984) pour la surveillance de la pollution par les
hydrocarbures en mer. Elle permet d'apprécier globalement la teneur en hydrocarbures
aromatiques. Elle est très sensible et peu sujette aux interférences. Elle ne fournit que très peu
d'informations sur la nature des produits dosés lorsque les longueurs d'onde d'excitation et
d’émission sont fixées.
III.3.1.1. Principe
La fluorescence est un phénomène qui se produit en deux phases :
Matériel et méthodes
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Cette opération est identique à celle décrite pour l’eau de mer. Le fractionnement par
chromatographie sur colonne remplie préalablement de gel de silice, alumine avec des
proportions préalablement définies à permet d’obtenir les des fractions
F1 : Fraction aliphatique après élution avec 20ml d’Hexane
F2 : fraction aromatique après élution avec 20 ml d’un mélange d’hexane/ Dichlorométhane
(50 :50)
III.3. Technique d’analyse des hydrocarbures
Différentes techniques ont été mises en œuvre pour l’analyse des polluants organiques marins.
Les méthodes spectrales avec la chromatographie en phase gazeuse offrent des résultats
particulièrement satisfaisants du point de vue quantitatif et qualitatif.
La spectroscopie est une technique d’analyse des molécules qui se base sur la manière dont
celle-ci absorbent les radiations. Parmi les techniques les plus souvent utilisées en chimie
organique, nous avons utilisé dans notre travail la spectrofluorométrie à rayonnement
ultraviolet (S.F.U.V).
III.3.1. Spectrofluorométrie à rayonnement ultraviolet (S.F.U.V)
La SFUV sensible essentiellement aux hydrocarbures aromatiques, ne permet pas un dosage
au sens strict des hydrocarbures totaux dans un échantillon marin; les teneurs mesurées ne
représentent pas réellement les concentrations absolues d'hydrocarbures. Par contre, la
réponse de fluorescence fournit un excellent indice de pollution pétrolière, du fait des très
faibles teneurs en hydrocarbures aromatiques biogènes dans le milieu marin. La SFUV est
beaucoup plus sensible que la spectroscopie Infra-Rouge : la limite de détection est de l'ordre
de 0,1 g/1 pour l’eau de mer (Roussel, 1983).
La SFUV est préconisée par la COI, (1984) pour la surveillance de la pollution par les
hydrocarbures en mer. Elle permet d'apprécier globalement la teneur en hydrocarbures
aromatiques. Elle est très sensible et peu sujette aux interférences. Elle ne fournit que très peu
d'informations sur la nature des produits dosés lorsque les longueurs d'onde d'excitation et
d’émission sont fixées.
III.3.1.1. Principe
La fluorescence est un phénomène qui se produit en deux phases :