CHAPITRE II
Matériel et méthodes
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II.3.2.2.2.Recherche et dénombrement des bactéries dans les moules :
a. Prélèvement et transport des échantillons (DELARRAS et TREBAOL, 2003. Modifié):
- Prélever des moules vivantes en nombre suffisant pour obtenir au moins 50g de chaire et de
liquide inter-valvaire.
- Placer les moules dans des sacs en matière plastique à usage unique, étanches et résistants,
puis les transporter dans des glacières isotherme à une température comprise entre +2 et
+15°C.
- Au laboratoire, conserver les échantillons au froid (+6±2°C) jusqu’à leur analyse, sans
dépasser 24 heures d’attente.
b. Préparation de la suspension mère des moules :
Prendre les moules encore vivantes et non endommagées et procéder comme suit :
- Laver soigneusement l’extérieur des moules sous eau courante potable et les brosser de façon
à éliminer les souillures externes ;
- Mettre les moules dans un récipient stérile, verser dessus de l’acide biocide, rincer à l’eau
distillée stérile, les égoutter ;
- Ouvrir stérilement les moules à l’aide d’un couteau à huitre ou d’un scalpel stérile ;
- Recueillir le liquide inter-valvaire et la chaire des moules dans un bol stérile ;
- Peser et introduire aseptiquement 25g de chaire dans un sachet stérile de type « Stomacher
400 » contenant au préalable 225ml de diluant soit le TSE (Tryptone Sel Eau) ;
- Homogénéiser pendant 6 à 8 minutes dans un broyeur stomacher ;
- Laisser reposer la suspension préparée pendant 15 à 30 minutes à température ambiante, temps
de revivification des germes.
- La suspension qu’on obtiendra constitue alors la dilution mère (DM) qui correspond donc à la
dilution 10
-1 .
- Préparer deux échantillons de cette dilution, l’un servira à la recherche des salmonelles, l’autre
à la recherche des autres germes.
Figure 10 : Dilution mère contenant 25g de chaire et 225ml de TSE
Matériel et méthodes
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II.3.2.2.2.Recherche et dénombrement des bactéries dans les moules :
a. Prélèvement et transport des échantillons (DELARRAS et TREBAOL, 2003. Modifié):
- Prélever des moules vivantes en nombre suffisant pour obtenir au moins 50g de chaire et de
liquide inter-valvaire.
- Placer les moules dans des sacs en matière plastique à usage unique, étanches et résistants,
puis les transporter dans des glacières isotherme à une température comprise entre +2 et
+15°C.
- Au laboratoire, conserver les échantillons au froid (+6±2°C) jusqu’à leur analyse, sans
dépasser 24 heures d’attente.
b. Préparation de la suspension mère des moules :
Prendre les moules encore vivantes et non endommagées et procéder comme suit :
- Laver soigneusement l’extérieur des moules sous eau courante potable et les brosser de façon
à éliminer les souillures externes ;
- Mettre les moules dans un récipient stérile, verser dessus de l’acide biocide, rincer à l’eau
distillée stérile, les égoutter ;
- Ouvrir stérilement les moules à l’aide d’un couteau à huitre ou d’un scalpel stérile ;
- Recueillir le liquide inter-valvaire et la chaire des moules dans un bol stérile ;
- Peser et introduire aseptiquement 25g de chaire dans un sachet stérile de type « Stomacher
400 » contenant au préalable 225ml de diluant soit le TSE (Tryptone Sel Eau) ;
- Homogénéiser pendant 6 à 8 minutes dans un broyeur stomacher ;
- Laisser reposer la suspension préparée pendant 15 à 30 minutes à température ambiante, temps
de revivification des germes.
- La suspension qu’on obtiendra constitue alors la dilution mère (DM) qui correspond donc à la
dilution 10
-1 .
- Préparer deux échantillons de cette dilution, l’un servira à la recherche des salmonelles, l’autre
à la recherche des autres germes.
Figure 10 : Dilution mère contenant 25g de chaire et 225ml de TSE