CHAPITRE II
Matériel et méthodes
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2. Vibrions :
 Enrichissement :
Le milieu d’enrichissement des vibrions est l’eau peptonée alcaline (EPA) 10 fois concentrée.
Au 50ml d’EPA, on ajoute 450ml d’eau de mer puis l’incubation se fait à 37°C pendant 24 à 48
heures.
Figure 9 : Technique de d’enrichissement des vibrions dans l’eau.
 Isolement :
A partir du milieu d’enrichissement on procède à l’étalement d’une goutte prélevée à la
surface du flacon d’EPA sur gélose Nutritive Alcaline Biliée (GNAB) ou sur milieu Thiosulfate,
Citrate, Bile, Saccharose (TCBS), L’incubation est faite à 37°C pendant 18 à 24 heures.
 La lecture :
 Sur TCBS :
Les colonies apparaissent en :
- Petites colonies Vertes claires avec virage du milieu vers l’orange (réduction du saccharose).
- colonies jaune brunes : Vibrio cholerae
- colonies jaunes translucides de grande taille
-Colonies incolore au centre vert : Vibrio parahaemolyticus
- Colonies orange saumon
- Colonies marron de grande taille
- Colonies orange bombées, d’autres sont transparentes.
 Sur GNAB :
Les colonies observées sur gélose GNAB sont des colonies transparentes légèrement bleutées,
luisantes avec contour régulier (ressemble à une goutte d’eau).